[发明专利]防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂及制备方法

权利要求书

1.防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂，其特征在于，包括如下重量份的组份：荧光假单孢液体菌种50～70份；哈次木霉液体菌种10～30份；甲壳素原液10～30份；

所述荧光假单孢液体菌种由荧光假单孢菌经培养基A单独培养后、再经培养基C培养熟化制得；

所述哈次木霉液体菌种由哈次木霉经培养基B单独培养后、再经培养基C培养熟化制得；

所述甲壳素原液的质量浓度为3～10％。

2.如权利要求1所述的防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂，其特征在于，包括如下重量份的组份：荧光假单孢液体菌种60份；哈次木霉液体菌种20份；甲壳素原液20份。

3.如权利要求1所述的防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂，其特征在于，所述培养基A由如下方法制备：取氨基酸、磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量为氨基酸1.5～2.5％、磷酸二氢钾1.5～2.5％、葡萄糖0.5～1.5％、蛋白胨0.1～0.9％、尿素0.1～0.9％、牛肉膏0.5～1.5％的混合液，pH值6.5～7.5，得培养基A。

4.如权利要求1所述的防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂，其特征在于，所述培养基B由如下方法制备：取硝酸钾、氯化钠、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量为硝酸钾0.3～0.8％、氯化钠0.1～0.3％，糖蜜3～8％，葡萄糖1～3％的混合液，pH值6.5～7.5，得培养基B。

5.如权利要求1所述的防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂，其特征在于，所述培养基C包括如下重量份的组份：大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；琼脂1～3份；磷酸氢二钾8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。

6.防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、培养基的制备

(1)培养基A的制备

取氨基酸、磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量为氨基酸1.5～2.5％、磷酸二氢钾1.5～2.5％、葡萄糖0.5～1.5％、蛋白胨0.1～0.9％、尿素0.1～0.9％、牛肉膏0.5～1.5％的混合液，pH值6.5～7.5，得培养基A；

(2)培养基B的制备

取硝酸钾、氯化钠、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量为硝酸钾0.3～0.8％、氯化钠0.1～0.3％，糖蜜3～8％，葡萄糖1～3％的混合液，pH值6.5～7.5，得培养基B；

(3)培养基C的制备

按重量份称取如下组份：大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；琼脂1～3份；磷酸氢二钾8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份，得培养基C；

步骤二、液体菌种的培养

取荧光假单孢菌先在无菌室纯化复壮，然后用500克培养基A进行培养，得到荧光假单孢菌液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；

取哈次木霉先在无菌室纯化复壮，然后用500克培养基B进行培养，得到哈次木霉液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；

步骤三、液体菌种的熟化

将步骤二中培养后的荧光假单孢菌液体菌种和哈次木霉液体菌种分别投入90～100公斤培养基C中，在种子罐内25～35℃培养5～8天，熟化后备用；

步骤四、液体菌种的复合与强化

取步骤三中熟化后的荧光假单孢菌液体菌种、哈次木霉液体菌种以及甲壳素原液按比例混合成复合体，培养25天左右即制得该防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂。

7.如权利要求6所述的防治烟草黑胫病、低头黑病的复合型生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤四中各组份的重量份配比如下：荧光假单孢液体菌种50～70份；哈次木霉液体菌种10～30份；甲壳素原液10～30份。