[发明专利]寒湿泄泻动物模型的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及构建医药实验动物模型技术领域，尤其涉及一种寒湿泄泻动物模型的建立方法。

背景技术

泄泻系因感受外邪，或饮食内伤，致脾失健运，大肠传导失司，湿盛内阻，以大便次数增多，质稀溏或完谷不化，甚如水样为主要表现的病症，在中(兽)医临床中很常见。近年来，国内外学者为研究泄泻机制、开发治疗泄泻的药物，对泄泻动物模型进行了大量研究。其造模方法主要包括：细菌、病毒、中药、西药等诱导的泄泻模型。这些模型大多忽略了与中(兽)医证型的吻合，且造模因素单一。从中(兽)医证型上来说，泄泻主要分为：湿热泄泻、寒湿泄泻、伤食泄泻、脾虚泄泻、肾阳虚泄和肝郁乘脾泄等。

古书《素问·六元正纪大论》日“民病寒湿，发肌肉痿，…濡泻，血溢”，提出人体外感寒湿，除了机体四肢的变化，还会引起泄泻；《灵枢·百病始生》：“多寒则肠鸣歹食泄，食不化。”提出感受寒邪则容易导致饮食物的难以消化吸收；《素问·至真要大论》日：“太阳之胜，寒人下焦，传为濡泻。”论述到寒湿泄泻的发生，外因责之寒湿邪气，内因责之脾肾阳虚。明代戴思恭州在从湿论治泄泻上.首先区分泄泻之虚实寒热，指出：鹜泄者，所下澄澈清冷，小便清白，湿兼寒也；明代张介宾提出“太阳之胜，水邪盛也……寒人下焦，故传为大便濡泻”，在前代医家的基础上指出寒邪入侵下焦，导致肾阳衰微，不能温煦脾土，继而脾精微不布，水湿内生，寒湿聚集交杂，故发生泄泻；寒湿泄泻多发于秋季，病机为寒湿内盛，脾失健运，清浊不分，其临床症状表现为泻下清稀，甚如水样，恶寒，腹痛肠鸣，兼夹食欲不振、脘腹闷胀，舌苔白或白腻，脉濡缓。嗜酒，浓茶肥甘，辛辣等，久之亦伤损胃肠，辛辣助火，肥甘生痰。一般地说暴饮暴食或长期贪食生冷，可遏伤脾阳，以致寒气内生，发生胃脘痛、腹痛、泄泻诸症.。

建立科学可靠的寒湿泄泻动物模型是进行其机理研究的基础。为进一步深入探讨湿热泄泻的本质及探寻其有效治疗中药，很有必要进行寒湿泄泻动物模型复制的研究。理想的证型动物模型复制方法要求客观、稳定、重复性好，病因、临床表现、疗效等符合中(兽)医理论的指导。

泄泻中最常见的为湿热泄泻，泄泻病症的动物模型多以热型泄泻病证的动物模型为主，而现有的表现为寒湿型泄泻病证的动物模型其造模方法存在以下不足之处：(1)模型大多采用饲喂高糖高脂饲料的方法来造“内湿”，没有把“饥饱失常”对脾胃损失的因素加入其中，这种方法对脾胃造成损伤需要的时间较长，短时间内难以积累足够“内湿”；(2)模型大多采用大肠杆菌灌胃的方法，大肠杆菌经胃的消化以及低PH环境后其致泻能力大大减弱。

发明内容

针对现有技术中存在的技术问题，本案提供一种寒湿泄泻动物模型的建立方法。

为实现上述目的，本案通过以下技术方案实现：

一种寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，该方法包括：将大鼠置于代谢笼中，自由饮用糖水；隔日禁食隔日饲喂充足饲料并灌胃D-半乳糖，连续10天；第11-15天每日灌冰水并置于低温高湿环境，连续5天；第16天腹腔注射志贺氏菌，48h后再注射一次，得到寒湿泄泻动物模型。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，所述糖水浓度为10％。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，所述D-半乳糖的浓度为2％，灌胃量为20ml/kg。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，所述冰水灌胃量为50ml/kg。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，所述低温高湿环境温度为10±2℃，相对湿度为90±2％。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，所述志贺氏菌为宋内氏志贺氏菌，培养浓度为1.5×10⁸CFU/ml，腹腔注射的剂量为当天1.0ml/kg，48h后的注射量为0.5ml/kg。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，所用大鼠为SPF级SD大鼠，7周龄，体重160-180g。

优选的是，所述的寒湿泄泻动物模型的建立方法，其中，寒湿泄泻的症状包括大便清稀，尾部及肛周污染，食欲不振，耳、鼻、四肢发凉，舌苔白和白腻中的至少一种。

本发明的有益效果是：

本发明所构建的动物模型与寒湿泄泻症临床病变症状、体征相似，并经过重复建模，证明其重复性和稳定性好，适用于治疗寒湿泄泻症的中药筛选，可为发展相关的新药研发提供实验依据。

附图说明

图1为寒湿泄泻整个造模过程中大鼠的体重变化趋势图。

具体实施方式