[发明专利]人胚胎干细胞的分化

权利要求书

1.一种产生胰腺内胚层细胞的方法，包括如下步骤：通过用至少导蛋白、成头蛋白和TGF-βR-1激酶抑制剂处理定形内胚层细胞使所述定形内胚层细胞分化成胰腺内胚层细胞，其中所述定形内胚层细胞来源于人多能干细胞，以及所述人多能干细胞是来源于确立的人胚胎干细胞系的细胞或确立的人胚胎干细胞系。

2.一种产生胰腺内胚层细胞的方法，包括如下步骤：

a.使多能干细胞分化成定形内胚层细胞，和

b.通过用至少导蛋白、成头蛋白和TGF-βR-1激酶抑制剂处理定形内胚层细胞使所述定形内胚层细胞分化成胰腺内胚层细胞，其中所述多能干细胞是人多能干细胞，以及所述人多能干细胞是来源于确立的人胚胎干细胞系的细胞或确立的人胚胎干细胞系。

3.权利要求2的方法，还包括培养多能干细胞。

4.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用至少一种选自如下的因子处理1至6天：视黄酸、FGF-2、FGF-4、FGF-7、FGF-10、音猬蛋白抑制剂、能抑制BMP的因子。

5.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用音猬蛋白抑制剂和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理1至3天，然后用音猬蛋白抑制剂、视黄酸和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理所述细胞1至4天。

6.权利要求5的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用音猬蛋白抑制剂、视黄酸和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理4天。

7.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用音猬蛋白抑制剂和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理1至3天，然后用音猬蛋白抑制剂、能抑制BMP的因子、视黄酸和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理所述细胞1至4天。

8.权利要求7的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用音猬蛋白抑制剂和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理3天。

9.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用音猬蛋白抑制剂、能抑制BMP的因子、视黄酸和和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理4天。

10.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞用音猬蛋白抑制剂和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理1至3天，然后用音猬蛋白抑制剂、能抑制BMP的因子、导蛋白、视黄酸和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理所述细胞1至4天。

11.权利要求10的方法，其中将所述定形内胚层细胞用音猬蛋白抑制剂和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理3天。

12.权利要求10的方法，其中将所述定形内胚层细胞用音猬蛋白抑制剂、能抑制BMP的因子、所述导蛋白、视黄酸和至少一种选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理4天。

13.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用所述选自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子处理。

14.权利要求13的方法，其中将所述定形内胚层细胞用FGF-7以50pg/ml至50μg/ml的浓度处理。

15.权利要求1或2的方法，其中将所述定形内胚层细胞还用视黄酸处理。