[发明专利]一种荧光定量检测FSH的免疫层析试剂条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于免疫诊断技术领域，具体涉及一种荧光定量检测促卵泡生成素（FSH）的免疫层析试纸条及其制备方法。

背景技术

促卵泡生成素（FSH）是一种糖蛋白激素，带有两个亚基。α亚基类似于黄体生成素（LH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）以及促甲状腺激素（TSH）的α亚基。β亚基不同于其他糖蛋白激素的β亚基，并显示出其特殊的生物化学特性。

对于女性，FSH在下丘脑-垂体-卵巢调节环路中发挥作用，控制月经周期。FSH和LH从垂体的促性腺细胞中阵发性释放，血中的浓度由类固醇类激素通过下丘脑的负反馈机制控制。在卵巢中FSH和LH一起刺激卵泡的成熟，进而刺激卵泡中雌激素的生物合成。FSH水平在月经周期的中期呈现一高峰，但不如LH明显，由于卵巢功能的变化和雌激素水平的下降，绝经期FSH达到高水平。FSH的水平会因绝经期、阉割以及卵巢早衰的影响而上升。FSH和LH或FSH和雌激素浓度出现异常时，可能为神经性厌食症或多囊卵巢疾病。

对于男性，FSH能够调节细精管的发育以及精子发生过程。与雌激素不同，雄性激素不能降低FSH的水平，男性体内的FSH水平只受血清中LH的调节。少精症和无精子症的患者通常会出现FSH升高，睾丸肿瘤患者血清的FSH浓度一般会下降，男性体内出现高水平FSH时，可能为先天性睾丸发育不全或原发性睾丸衰竭。

目前临床上FSH的检测方法有酶联免疫法（ELISA）、化学发光法和胶体金免疫层析法等，这些方法都有各自的优点和不足。ELISA法检测步骤多、耗时长，操作过程的影响因素较多，易造成假阳性和假阴性结果。因此目前逐步被化学发光法替代，但这类方法为全封闭系统，价格昂贵，需要专门培训仪器使用人员，维修及检测成本高，并且不适合单人份和小批量检测用，目前不利于FSH检测在国内的广泛开展，胶体金法操作简单、适合单人份检测，但测试结果只能通过肉眼观察，给出定性或半定量结果。

鉴于目前尚无快速、准确的定量检测FSH的方法，本发明的目的是提供一种可用于快速定量检测FSH的免疫层析试纸条，用于评估和监测体内促卵泡生成素的水平，所述试剂具有操作简单、方便快捷、经济、准确定量等优点，更适用于在各医疗机构广泛开展。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中存在的不足，提供一种操作简单、方便快捷、经济、测定准确的FSH检测试纸条。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种荧光定量检测FSH的免疫层析试纸条，由样品垫、标记垫、包被膜、吸水纸顺次搭接在PVC底板上构成，所述的标记垫和所述的样品垫相接，所述的包被膜和所述的标记垫相接，所述的吸水纸和所述的包被膜相接；所述标记垫上喷涂有荧光微球标记的FSH单克隆抗体和荧光微球标记的亲和素；所述包被膜包含检测线和质控线，检测线和质控线间隔4~8 mm，所述检测线包被有与所述荧光微球标记的FSH单克隆抗体处于不同表位的另一种FSH单克隆抗体。所述质控线包被有特异性识别亲和素的兔抗亲和素抗体。

优选地，所述荧光微球标记的FSH单克隆抗体的浓度为0.1~1.0 mg/mL，稀释比例为5%~20%。

所述荧光微球标记的亲和素的浓度为0.1~1.0 mg/mL，稀释比例为0.5%~5%。所述含荧光微球标记的FSH单克隆抗体和荧光微球标记的亲和素的标记垫处理液的喷量为3~6 μL/cm。

优选地，所述荧光微球的粒径为100~500 nm。所述荧光微球的激发波长为310~550 nm，发射波长为340~ 620 nm。

优选地，所述包被膜检测线上包被的FSH单克隆抗体的浓度为0.5~2 mg/mL，喷量0.1~0.2μL/mm。

所述质控线上包被的兔抗亲和素抗体的浓度为0.5~2 mg/mL，喷量0.1~0.2μL/mm。

本发明还提供一种荧光定量检测FSH的免疫层析试纸条的方法，包括以下步骤：

（1）荧光微球标记蛋白的制备