[发明专利]一种核糖体rRNA双光子荧光探针-季铵盐三联吡啶衍生物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种核糖体rRNA双光子荧光探针‑季铵盐三联吡啶衍生物及其制备方法和用途，其中核糖体rRNA双光子荧光探针‑季铵盐三联吡啶衍生物的结构式为：本发明目标产物可以通过双光子荧光增强对RNA进行识别，是一种双光子荧光增强的识别效应，低能量的长波(710nm)激发对生物体损伤小。特异性识别细胞核仁内的rRNA，本发明目标产物与核仁商染Syto 9在细胞核仁处的共定位效果很好，皮尔森系数可达到90％。

一、技术领域

本发明涉及一种核糖体rRNA荧光探针，具体地说是一种核糖体rRNA双光子荧光探针-季铵盐三联吡啶衍生物及其制备方法和用途。

二、背景技术

最近德国生物化学家Thomas Carell在《科学》杂志上提出，RNA是形成所有生命的首个自复制分子，可以作为生命的起源物质。RNA分子包括转运RNA(tRNA)，信使RNA(mRNA)和核糖体RNA(rRNA)，具有很多功能，如体内运输、遗传信息的解读、基因表达的调控以及一些必要的生物催化作用。其中rRNA是细胞内含量最多的RNA，它可以在核仁内与蛋白结合，产生核糖体。借助rRNA荧光探针，可以在共聚焦显微镜下观察rRNA在体内的存在状态和活动行为。但是很多分子对细胞核膜穿透性差，难以进入细胞核内，所以有关rRNA探针的报道不多。目前，市场上唯一可利用的是SYTO系列RNA探针，由于SYTO探针的分子结构至今没有公开，大大限制了对SYTO探针进一步的研究。

2006年，纽约大学的Qian Li和Young-Tae Chang用三种吡啶盐来识别活细胞中的RNA，同年，杜伦大学的David Parker课题组用Eu配合物来特异性识别核仁，但是以上的RNA探针都是单光子荧光探针。相对于单光子探针，双光子荧光探针具有高穿透性，低的细胞损伤，长波长可避免生物体内自发荧光干扰等特点。发明人课题组在2016年的ChemicalScience上报道了双光子比率荧光探针对DNA和RNA的识别。以上提到的探针都是同时识别细胞核仁和细胞质中的RNA，不能特异性识别rRNA、mRNA或tRNA。合成特异性识别rRNA的探针，对检测细胞内rRNA的状态和活动具有重要意义。

申请人对本申请的主题进行了如下的文献检索：

1、http://scholar.glgoo.org/网检索结果：(2017/6/19)

2、中国知网检索结果：

检索方式一：

篇名-一种水溶性双光子荧光核糖体RNA探针-季铵盐三联吡啶衍生物及制备方法：无相关文献。

篇名-一种水溶性双光子荧光RNA探针-季铵盐三联吡啶衍生物及制备方法：无相关文献。

篇名-一种水溶性荧光RNA探针-季铵盐三联吡啶衍生物及制备方法：无相关文献。

检索方式二：

全文-一种水溶性双光子荧光核糖体RNA探针-季铵盐三联吡啶衍生物及制备方法：45篇相关文献，均与水溶性双光子荧光核糖体RNA探针无关。

全文-一种水溶性双光子荧光核糖体RNA探针-季铵盐三联吡啶衍生物及制备方法：331篇相关文献，均与水溶性双光子荧光核糖体RNA探针无关。

三、发明内容

本发明旨在提供一种核糖体rRNA双光子荧光探针-季铵盐三联吡啶衍生物及其制备方法和用途。所要解决的技术问题是通过分子设计合成特异性识别rRNA的双光子荧光探针。