[发明专利]提高反应稳定性的胆汁酸检测试剂

说明书

技术领域

本发明涉及胆汁酸检测试剂领域，尤其涉及一种提高反应稳定性的胆汁酸 检测试剂。

背景技术

人体血清总胆汁酸(TBA)是由肝脏合成并分解代谢，从而维持人体胆汁 酸的相对稳定，它的调控是肝脏的一个主要功能。总胆汁酸是在肝脏内由胆固 醇合成，与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸，然后被肝细胞分泌入胆汁， 随胆汁至肠道后，在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸，95％以上的胆汁 酸被肠壁吸收经门静脉血重返肝脏利用，称为胆汁酸肠—肝循环。故正常人血 中胆汁酸浓度很低。胆汁酸的生成和代谢与肝脏有十分密切的关系，一旦当肝 细胞发生病变，血清胆汁酸很容易升高，因而血清胆汁酸水平是反映肝实质损 伤的一项重要指标。

各类肝胆疾病的TBA升高：急性肝炎与肝癌均为100％，肝硬化为87.5％， 慢性肝炎、胆道疾病也达65％以上。说明了肝胆疾病中TBA测定比传统肝功能 指标任何一项都敏感。

急性肝炎与慢性肝炎的TBA有差异：急性肝炎时患者血清TBA与丙氨酸 转氨基酶(ALT)一样，呈显著增高，平均增高幅度是正常的31倍，说明TBA 对急性肝炎早期诊断价值与ALT(阳性率100％)测定相同，经积极治疗后随肝细 胞损害的控制很快转为正常，而TBA则随肝功能的恢复逐渐转为正常。慢性肝 炎时，TBA阳性率为65.7％，平均升高幅度为正常的10倍。

肝癌、肝硬化时，由于肝脏对TBA代谢功能下降，故血清TBA在不同阶 段都增高。当肝癌时，TBA阳性率为100％，而肝硬化TBA阳性率为88％，亦 高于其他指标。

目前检测胆汁酸的方法主要为循环酶法。但是此法不同浓度的样本，循环 次数控制不一致，导致检测结果重复性差，影响测定的准确度。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种胆汁酸测试剂，检测准确度高。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种提高反应稳定性的胆汁酸检测试剂，包括试剂R1和试剂R2；

每升所述胆汁酸检测试剂中所述试剂R1的组分为：

每升所述胆汁酸检测试剂中所述试剂R2的组分为：

优选地，所述试剂R1中，所述缓冲液为Hepes、Tris-HCL、三乙醇胺或 MOPS；所述缓冲液的PH值为3.0～5.5。

优选地，所述试剂R1中，所述酶稳定剂为牛血清白蛋白、丙三醇、甘露醇、 山梨醇或乙二醇。

优选地，所述试剂R1中，所述表面活性剂为Triton450、Triton100、Tween20 或Tween80。

优选地，所述试剂R1中，所述防腐剂为叠氮钠或PC300。

优选地，所述试剂R2中，所述缓冲液为Hepes、Tris-HCL、三乙醇胺或 MOPS；所述缓冲液的PH值为8.0～9.5。

优选地，所述试剂R2中，所述酶稳定剂为牛血清白蛋白、丙三醇、甘露醇、 山梨醇或乙二醇。

优选地，所述试剂R2中，所述表面活性剂为Triton450、Triton100、Tween20、 Tween80或PEG2000。

优选地，所述试剂R2中，所述防腐剂为叠氮钠或PC300。

本发明提供的一种提高反应稳定性的胆汁酸检测试剂，通过采用循环用辅 酶Thio-NAD、循环用酶3α-HSD，能够提高提高反应稳定性的胆汁酸检测试剂 的循环次数和循环反应速度，且检测试剂的准确度高、稳定性好、灵敏度高， 线性范围更广，同时可以减少主要反应物料的用量，减少了试剂的成本。另外， 通过优化Thio-NAD与3α-HSD的比例可以稳定反应速率，降低试剂本底反应， 增强检测灵敏度，检测结果准确可靠。本发明的检测试剂无需样本预处理，在 全自动生化分析仪上检测自动化，速度快。

附图说明

图1为日立7100与AU400检测实施例5的提高反应稳定性的胆汁酸检测 试剂的相关图；

图2为日立7100与东芝40检测实施例5的提高反应稳定性的胆汁酸检测 试剂的相关图；

图3为AU400与东芝40检测实施例5的提高反应稳定性的胆汁酸检测试 剂的相关图；

图4为提高反应稳定性的胆汁酸检测试剂检测胆汁酸的原理图。

具体实施方式

为了进一步了解本发明，下面结合实施例对本发明的优选实施方案进行描 述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点而不是对 本发明专利要求的限制。