[发明专利]一种犬C反应蛋白胶体金免疫层析试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种犬C反应蛋白胶体金免疫层析试纸条，其特别适用于犬的CRP检测。

背景技术

C反应蛋白(CRP)是机体非免疫系统的组成成分，在多种哺乳动物疾病的急性期有重要的诊断警示作用。CRP在肝脏的合成反应主要由IL-1、IL-6和TNF-α等炎症因子所调节。CRP浓度受年龄、性别和体重的影响不大。在人类临床医学诊断中，CRP作为炎性或非炎性疾病的诊断标志物进行检测已超过30年。在兽医临床上，犬CRP的检测在临床应用中也比较广泛，包括急性感染性疾病的诊断和鉴别诊断、手术后感染的监测、抗生素疗效的观察、病程监测及预后判断等。犬CRP对疾病敏感度高，能在疾病早期快速升髙，及时反映病情；而且CRP的浓度不受到抗生素及免疫抑制剂的影响，在治疗中可以准确地对疾病的发展进行监测，在临床诊疗中具有很高的价值。因此作为炎症标记物，CRP在兽医临床上的作用日趋显著，检测犬CRP对临床诊断、疗效及预后观察等具有重要价值。

CRP是由肝脏合成的一种能与肺炎链球菌C多糖反应形成复合物的急性时相反应蛋白。它由5个相同的亚基单位以非共价方式联接，与人CRP不同，犬CRP的5个亚基中有两个被糖基化。研究表明，各种抗其他物种CRP蛋白的抗血清，都不能和急性期犬血清或者分离的犬CRP发生交叉反应，说明人和犬CRP没有共同的抗原性，这种现象也说明犬CRP的快速检测方法不能依赖于人的商品化CRP快速检测试纸条。目前，临床中快速检测犬CRP的方法多是依赖于临床检测仪器，这在普通宠物医院并不具备。而且，对于动物疫病诊断行业，很多情况下，对于疾病的诊断需要在野外进行，这对于现行犬CRP检测方法是没有办法完成的。胶体金免疫层析是一种建立在胶体金层析技术和抗原-抗体特异性免疫反应基础上的一种免疫检测技术。胶体金免疫层析试纸一般包括依次设于底板上且紧密搭接的样品吸收垫、结合垫、反应膜和吸水垫，底板设于塑料卡内，塑料卡上设有分别与样品吸收垫与反应膜配合的加样孔和显示窗口。

发明内容

鉴于以上所述现有产品的技术缺点，本发明的目的在于提供一种犬CRP胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明采取了以下技术方案：

一种犬C反应蛋白胶体金免疫层析试纸条，由样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫、底板依次组成，所述结合物释放垫上包被有鼠抗犬C反应蛋白单克隆抗体-胶体金标记物，所述反应膜上包括检测区和质控区，所述检测区包被有鸡抗犬C反应蛋白多克隆抗体，所述质控区包被有羊抗鼠抗抗体。

所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述鼠抗犬C反应蛋白单克隆抗体和鸡抗犬C反应蛋白多克隆抗体是以昆虫细胞杆状病毒载体系统所表达的犬C反应蛋白作为抗原制备获得。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，该方法包括以下步骤：

1)制备喷涂有鼠抗犬C反应蛋白单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2)制备包被有鸡抗犬C反应蛋白多克隆抗体的检测区和包被有羊抗鼠抗抗体的质控区的反应膜；

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

本发明的另一个目的是提供一种检测犬C反应蛋白的方法，该方法包括以下步骤：

1)样品前处理；

2)用上述的犬C反应蛋白胶体金免疫层析试纸条进行检测；

3)分析检测结果。

所述检测样品是犬全血、犬血清或犬血浆中的一种或多种物质。

本发明的有益效果为：

本发明所提供的犬CRP胶体金免疫层析试纸条可用于对犬全血、血清或血浆的检测，兼具高灵敏性和高特异性，能够快速检测犬CRP。此外，所述犬CRP胶体金免疫层析试纸条具有操作快速简便、结果准确、经济适用等特点。

附图说明

图1为试纸条剖面结构示意图。

图2为试纸条检测结果判定图。

图3为犬C反应蛋白样本相关性统计图。

图1中：1：样品吸收垫；2：结合物释放垫；3：反应膜；4：吸水垫；5：检测区；6：质控区；7：底板。

具体实施方式