[发明专利]一种抗体孵育试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了一种抗体孵育试剂盒及其使用方法，所述抗体孵育试剂盒，包含盒体和盒盖，所述盒体包含硅橡胶、不透水薄膜、湿巾和凹槽；所述盒体中装有硅橡胶，不透水薄膜平铺于硅橡胶上，不透水薄膜上设置有凹槽，盒体的内壁围有湿巾。使用方法为：在平铺于硅橡胶的不透水薄膜上制造出低于硅橡胶平面的凹槽，将杂交膜进行转膜、漂洗后，杂交膜含蛋白的一面向上，水平铺于凹槽内，滴加抗体稀释液，使杂交膜浸润于抗体稀释液中，进行杂交反应。本发明的抗体孵育试剂盒的使用方法操作简单、效果好、成本低。

技术领域

本发明属于实验器具领域，具体涉及一种抗体孵育试剂盒及其使用方法。

背景技术

生物实验中经常使用western blotting、southern blotting等印迹杂交方法检测目的条带。杂交的孵育过程，传统方法是将分子所在的膜完全浸泡在含有抗体的液体中，经过>1小时的时间使得抗体与膜上的目的分子结合。

Western blotting中，一般将膜与抗体置于小盒中，摇床上孵育，此方法每次所需的抗体量较大；难以应对多抗体孵育；抗体回收不完全，根据小盒的材质不同，回收的效率不尽相同。目前另一种抗体孵育的方法，是将膜和抗体置于塑封膜做成的小袋中，此方法在加样和抗体回收时造成时间和抗体的大量浪费，并且难以除去对实验有极大影响的气泡；另外一次性的使用塑封膜，造成资源浪费和环境污染。

因此很有必要提供一种方便快捷、效果稳定并且节约成本的试剂盒及其使用方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作简单、效果好、成本低的抗体孵育试剂盒及其使用方法。

为了实现本发明目的，本发明提供了一种抗体孵育试剂盒，包含盒体和盒盖，所述盒体包含硅橡胶、不透水薄膜、湿巾和凹槽；所述盒体中装有硅橡胶，不透水薄膜平铺于硅橡胶上，不透水薄膜上设置有凹槽，盒体的内壁围有湿巾。

进一步，所述硅橡胶为聚甲基乙烯基硅氧烷。

进一步，所述硅橡胶的厚度≥5mm。

进一步，所述不透水薄膜为锡箔纸、保鲜膜或封口膜。

进一步，所述凹槽的数量为一个以上。

进一步，所述凹槽为多边形，圆形或不规则形状；优选地，所述凹槽为契合杂交膜的多边形，圆形或不规则形状。

本发明还提供了一种上述抗体孵育试剂盒的使用方法：在平铺于硅橡胶的不透水薄膜上制造出低于硅橡胶平面的凹槽，将杂交膜进行转膜、漂洗后，杂交膜含蛋白的一面向上，另一面向凹槽底部，水平铺于凹槽内，滴加抗体稀释液，使杂交膜浸润于抗体稀释液中，进行杂交反应。

进一步，所述凹槽通过在不透水薄膜上施加一定压力形成，使不透水薄膜与凹槽紧密贴合，凹槽的深度为2-3mm，凹槽面积大于杂交膜的面积。

进一步，所述抗体稀释液的添加量为3～4mL抗体稀释液/(6cm×8cm)杂交膜。

进一步，所述杂交膜为PVDF膜或NC膜。

一般情况下，实验采用小盒孵育6cm×8cm杂交膜需10ml以上抗体稀释液，本发明抗体稀释液的添加量为3～4mL抗体稀释液/(6cm×8cm)杂交膜，大大减少了抗体用量，有效节约了试剂成本。

本发明所述抗体孵育试剂盒在盒体内壁围有一圈湿巾，可以有效防止稀释液的蒸发。

本发明利用硅橡胶的流动性和可塑性，使平铺于硅橡胶上的不透水薄膜制造出低于硅橡胶平面的凹槽，用于对抗体孵育提供空间。

本发明所述试剂盒简便高效，使用方法简单，可根据需要设置多个凹槽，同时进行不同抗体的孵育。凹槽可根据杂交膜的大小和形状制作，可为圆形、多边形或不规则图形，所形成的空间极小，正合适探针稀释液的施用，极大节省抗体量。