[发明专利]基于上转发光法的抗缪勒氏管激素定量测定试剂及方法

说明书

本发明涉及一种基于稀土纳米上转发光法的抗缪勒氏管激素(AMH)的定量检测试剂及其方法，采用上转发光法的UCP颗粒作为生物标记物，特异性的标记有抗AMH抗体，应用本发明可快速、简便、定量而且准确的测定样品中AMH的含量，为女性卵巢储备功能的评价提供检测依据。

技术领域

本发明涉及一种基于稀土纳米上转发光法的抗缪勒氏管激素(AMH)的定量检测试剂及试剂盒的制备方法，属生物技术和医疗器械的产品技术领域，主要用于对女性卵巢储备功能进行评价。

背景技术

抗缪勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone，AMH)1947年首先发现，是转化生长因子β超家族的成员之一，由两个相同的70KD亚基通过二硫键连接组成的二聚糖蛋白，相对分子为140KD；人类AMH编码基因位于19号染色体短臂，大小2.4-2.8kb，含有5个外显子。

AMH是评价卵巢储备功能的良好指标，且不受月经周期影响，随时可检测，血液中AMH含量可为多囊卵巢综合症(PCOS)的诊断提供新的参考指标；对卵巢早衰，卵巢颗粒细胞瘤，儿童性别发育异常的诊断有重要的意义；血液中AMH含量在辅助生殖技术(ART)前能准确地预测卵巢反应，并制定个体化刺激方案，一定程度提高妊娠率，降低并发症风险；可预测绝经年龄；此外，AMH在性腺器官发育过程中起着重要作用，是男女性腺功能的重要标记物之一。在欧美国家，血液AMH浓度水平已成为评估女性的卵巢功能的主要常规指标，常用的检测方法为酶联免疫法和电化学发光法；国内主要AMH检测主要是引入进口的电化学法发光法、酶联免疫法和胶体金法；电化学法发光法主要是Roche的AMH电化学发光法检测系统，酶联免疫法和胶体金法主要如专利“人抗苗勒激素的酶联免疫检测试剂，CN 104865391B”和“人抗苗勒氏管激素胶体金免疫层析检测试剂盒及方法，CN 105527447 A”分别公开的内容，但电化学发光法为非开放系统，价格昂贵，且需要专门培训仪器使用人员，维修及检测成本均高，不适于大范围推广使用；酶联免疫法耗时长、灵敏度低、背景值高、易造成假阳性和假阴性结果；胶体金法检测速度快，适合POCT快速检测，但灵敏度低、背景值高、易造成假阳性和假阴性结果，定量检测依靠色度或灰度比对，多为半定量检测，对检测结果不能准确定量。

经我们前期研究证实，稀土纳米上转发光颗粒(UCP颗粒)的新型标记物具有独特光学特性：高灵敏度，零背景干扰，高稳定性，高安全性等特点，使UCP颗粒作为生物标记物有着极为广泛的应用前景，在POCT快速领域具有独特的优势和很高的应用价值。

因此，研制一种基于稀土纳米上转发光法的抗缪勒氏管激素(AMH)的定量检测试剂及试剂盒，并应用于AMH的临床POCT快速检测领域，具有重要临床应用价值。

发明内容

本发明提供一种基于稀土纳米上转发光法的抗缪勒氏管激素(AMH)的定量检测试剂及其试剂盒的制备和应用方法，该试剂盒具有准确定量、零背景干扰，检测结果稳定，检测快速的特点。

具体地，本发明提供一种基于稀土纳米上转发光法的抗缪勒氏管激素(AMH)的定量检测试剂，其特征在于AMH定量检测试剂包括：样品垫、试剂垫、疏水性保护膜、分析膜、吸水垫、粘性低衬、数据存储装置和固定卡壳，其中疏水性保护膜能使加入的样品全部有效的通过试剂垫，并与试剂垫中的抗AMH抗体标记的UCP颗粒充分反应，提高灵敏度，数据存储装置存储有检测试剂的基本信息和定量检测的数据参数模型，可通过适配的上转发光免疫分析仪直接读取试剂信息和定量检测的数据参数模型，代替使用外部标准品检测，并绘制标准曲线，进行精确定量，并能有效降低不同批次试剂信息的录入错误率。

在一个优选的实施方案中，试剂垫中含有抗AMH抗体标记的UCP颗粒，分析膜中含有抗AMH抗体包被的检测线T线和羊抗鼠IgG包被的质控线C线；标记用的抗AMH抗体和包被用的抗AMH抗体具有不同的抗原表位，可特异性的血液样本中的抗缪勒氏管激素形成夹心复合物。