[发明专利]一种无毒株弓形体和中药多糖佐剂组合物的用途、疫苗及制备方法

说明书

本发明公开了一种无毒株弓形体和中药多糖佐剂组合物的用途、疫苗及制备方法，中药多糖佐剂可通过免疫协同作用，与弓形体的免疫激活作用配合，多靶点高效激活抗肿瘤的某些特异免疫调控通路，特别是与杀伤性T细胞免疫激活有关的抗肿瘤免疫通路可用于治疗肿瘤及制备治疗肿瘤的生物药物，尤其用于治疗消化道肿瘤，特别是对胆管癌具有显著的治疗作用。

技术领域

本发明涉及肿瘤生物治疗领域，具体涉及一种肿瘤药物、疫苗及制备方法。

背景技术

包括胆管癌在内的消化道肿瘤（包括胃癌、结直肠癌、肝胆胰癌等） 是我国的多发性癌症，严重威胁人民健康。胆管癌是一种起源于胆道上皮的高度恶性的肿瘤，胆管癌的发病率占消化道恶性肿瘤的3%，其发病率和死亡率，近年来在全球范围内持续增加，在我国胆管癌的发病率也在快速上升。胆管癌的增生性特点是肿瘤微血管极为丰富并且肿瘤基因异质性强，这使得诸如化疗放疗等辅助疗法治疗困难。目前，肿瘤的根治性切除和肝脏移植是已知的根治性治疗胆管癌方法，但由于胆管癌起病隐匿，易早期出现淋巴浸润及远处转移，患者住院时可能已经失去最佳手术时机，导致根治性切除率低且不稳定，术后年生存率极低。因此，迫切需要寻找新的胆管癌治疗方法。

肿瘤免疫治疗是目前国内外肿瘤研究的热点，肿瘤免疫治疗通过提高肿瘤细胞的免疫原性和对效应细胞杀伤的敏感性，激发和增强机体抗肿瘤免疫应答；目前肿瘤免疫治疗方法主要包括：单克隆抗体类免疫检查点抑制剂（如CTLA-4单抗、PD-1/PD-L1单抗等）、CAR-T细胞疗法、小分子抑制剂（如IDO）、肿瘤疫苗（如肿瘤抗原肽段疫苗、树突状细胞（DC）疫苗、溶瘤病毒疫苗等），以及生物治疗（如病原体疟原虫疫苗）等。虽然这些治疗方法在其他肿瘤的治疗中取得了一定的效果，但是对于胆管癌效果并不理想。

生物治疗涉及一切应用生物大分子进行治疗的方法，生物治疗通过调动宿主的天然防御机制或给予天然产生的针对性、靶向性很强的物质，来提高患者自身免疫能力，实现对肿瘤的治疗；目前生物治疗已成为继传统手术、放疗和化疗后最有发展前途的肿瘤治疗手段之一。生物治疗的一个重要特征是增强机体的免疫功能。大量的研究已表明，机体免疫系统对于肿瘤的发生发展具有重要的作用，作为肿瘤免疫防御系统，免疫系统可通过清除或抑制病毒感染来保护机体免受病毒诱发肿瘤；及时清除病原体和控制炎症防止建立有利于肿瘤发生的炎症环境；通过肿瘤免疫监视，特异性识别和消灭癌细胞或癌前细胞。目前研究表明，T淋巴细胞，尤其是CD8+T细胞是机体免疫系统监视和抑制肿瘤的最主要效应细胞。

虽然T细胞在许多肿瘤中存在并激活，但通常它们活性比较低，这可能主要归咎于抑制肿瘤微环境中T细胞的功能失调，肿瘤细胞为逃逸免疫监视发展了多种策略逃避或抑制T细胞应答：通过下调肿瘤细胞抗原或I类MHC分子，使T细胞发现不了肿瘤细胞；通过表达细胞毒性 T 细胞的抑制分子(PD-L1，CTLA-4)抑制肿瘤抗原特异性T细胞的活化；通过募集调节性T细胞或髓源性抑制细胞等抑制T细胞增殖和活化。肿瘤抗原特异性 T 细胞不但是机体免疫监视肿瘤的主要效应机制，同时也是肿瘤的免疫逃避的核心环节。如何有效激活机体T细胞免疫应答是目前肿瘤免疫治疗研究的重点。

弓形体（细胞内寄生病原体）是具有很强感染宿主细胞能力的单细胞真核微生物，感染后在宿主细胞内生存和复制，造成弓形体病，由于免疫正常宿主通常可通过免疫力清除弓形体感染，弓形体病相对危害小，目前多作为细胞内模式病原生物来研究。研究发现，弓形体感染宿主产生的细胞因子、化学因子，以及T细胞免疫反应具有良好的抗肿瘤效果。例如，50年前弓形体感染已被发现具有抗肿瘤效果，来自于死的弓形体的蛋白提取物被证明可抑制多种肿瘤的生长，包括纤维肉瘤、肺癌、黑色素瘤、肉瘤及化学方法诱导的肿瘤等。应用活的弓形体感染小鼠也被发现可抑制小鼠膀胱癌、脑肿瘤、白血病、Lewis肺癌、黑色素瘤等多种癌症的生长。然而，由于野生型弓形体的感染对宿主的危害问题，活的弓形体不太适合应用于肿瘤患者的治疗，另外癌症患者常伴有免疫力低下，更易于受到弓形体的感染伤害。