[发明专利]一种采血管及其应用

说明书

本发明公开了一种采血管及其应用。采血管内有一段DNA作为质控标准品，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，采血管内还包括稳定保护剂，所述稳定保护剂包括甲醛释放剂、防腐剂、抗凝剂和氯化盐。本发明采血管可以实现常温条件下对样品特别是血浆中游离DNA的稳定保存，还可长期有效对采血管的性能进行监测，排查样本溶血因素，便于采血管的质控管理，避免因采血管质量不稳定引起的问题，且对后续检测结果无影响，可应用于实验室、医疗等多个领域的生物检测中，具有良好的应用价值。

技术领域

本发明属生物检测技术领域，更具体地说，本发明涉及一种能在常温条件下对血浆中游离DNA的保存和运输且对后续检测结果无影响，同时可实现质控管理的采血管。

背景技术

随着二代基因测序技术的快速发展，基于基因测序技术的无创产前诊断已成为胎儿遗传病诊断领域的有力手段。无创产前诊断主要是利用孕妇血浆中游离胎儿DNA进行特异的产前筛查和诊断，但是，孕妇血浆中胎儿游离DNA的含量极少，仅占总游离DNA的约5～7％，且极易收到母体有核细胞破裂释放出的染色体DNA污染和细胞内高浓度的DNA酶降解。

目前针对游离DNA，如cfDNA和ctDNA的检测中，血样采集、运输和保存多使用特殊采血管，但均存在以下局限性：首先，仅有抗凝剂的采血管，对储存和运输条件的要求苛刻，血液样本不易保存，且保存时间有限，不利于边远地区进行采样；其次，含有血细胞保护剂、游离DNA保护剂、抗凝剂的采血管，可有效对游离DNA进行保护，也可以在常温条件下进行运输，但采血管自身检测和监测尚为空白。现在对采血管的质控监测多采用物理、外观、负压等方式，监测结果的有效性和稳定性不佳。

有鉴于此，确有必要提供一种既能在常温条件下对血浆中游离DNA进行保存和运输且对后续检测结果无影响，同时可实现质控管理的采血管。

发明内容

本发明的目的在于：克服现有采血管存在的缺陷，提供一种既能在常温条件下对血浆中游离DNA进行保存和运输且对后续检测结果无影响，同时可实现质控管理的采血管。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种采血管，其内有一段DNA作为质控标准品，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，采血管内还包括稳定保护剂，所述稳定保护剂包括甲醛释放剂、防腐剂、抗凝剂和氯化盐。

作为本发明采血管的一种改进，所述质控标准品为液体或干粉。

作为本发明采血管的一种改进，所述甲醛释放剂为双羟甲基咪唑烷基脲，所述防腐剂为苯甲酸钠，所述抗凝剂为乙二胺四乙酸三钾，所述氯化盐为氯化钠。

作为本发明采血管的一种改进，所述质控标准品和所述稳定保护剂在采血管中的总体积为51～600μL。

作为本发明采血管的一种改进，所述质控标准品的浓度为1～10pmol/μL，所述质控标准品的添加量为1～300μL，所述稳定保护剂的添加量为50～300μL；按质量百分比计，所述稳定保护剂包括：去离子水60～70％，甲醛释放剂8～15％，防腐剂8～15％，抗凝剂5～8％，氯化盐0.1～2％。

作为本发明采血管的一种改进，质控标准品的制备方法包括：化学合成特定的单链核酸序列如SEQ ID NO:1所示；将SEQ ID NO:1所示序列合成双链DNA，采用聚丙烯酰胺胶纯化回收，12000r/min离心10min，加入去离子水梯度稀释至所需浓度。

作为本发明采血管的一种改进，所述稳定保护剂的制备方法包括：按照比例称取甲醛释放剂、防腐剂、抗凝剂和氯化盐混合搅拌，加入去离子水定容。

作为本发明采血管的一种改进，所述质控标准品和所述稳定保护剂在采血管中混合，pH值为7.0。

本发明采血管可用于生物检测中，特别适合于采集、保存和运输孕妇血浆。

相对于现有技术，本发明采血管及其应用具有如下优点：