[发明专利]一种基于代谢组学分析的用于抗氧化衰老药物筛选的大鼠模型的构建方法

说明书

本发明公开了一种基于代谢组学分析的用于抗氧化衰老药物筛选的大鼠模型的构建方法。采用LC‑MS谱对采集的尿样检测分析；采用PCA、PLS‑DA及OPLS‑DA等技术对正常对照组、模型组、阳性对照组、鞣花酸高剂量组、中剂量组、低剂量组六组大鼠尿液代谢物进行聚类分析，筛选出潜在的生物标志物；运用KEGG数据库进行信号通路分析，用HMDB数据库对代谢产物分子注释、相关的酶或转运蛋白及其相关性质进行分析，Met PA网络软件对代谢产物路径进行可视化作图，构建鞣花酸改善D‑型半乳糖致衰老大鼠尿液代谢组学的代谢通路，为抗氧化衰老药物新药的筛选、评价和研发提供代谢组学方法思路。

技术领域

本发明属于代谢组学分析技术领域，具体涉及一种基于代谢组学分析的用于抗氧化衰老药物筛选的大鼠模型的构建方法。

背景技术

衰老是一种受遗传、环境条件、生活方式等多种复杂因素影响的生物学过程^[1]。自由基衰老学说认为机体细胞代谢产生的自由基引起的氧化损伤是加速机体衰老的关键因素；随着衰老的加剧，机体各种生理功能也随之下降，表现为精神不振、健忘、形寒肢冷、纳差少眠、腰膝无力、气短乏力，甚则面浮肿等，对人体的身体健康和生活质量也是极为不利的^[2]。衰老虽不可逆转，但可以缓解。大量研究表明，补充抗氧化剂则可以起到清除自由基，减缓衰老的作用^[3]。然而，现阶段对衰老及其防治措施的研究还远远不够，因此抗氧化衰老药物的筛选及其开发研究仍然是当前众多学者备受关注的重点课题之一。

目前，D-半乳糖亚急性损伤模型是研究衰老机制、筛选抗氧化衰老药物常用的动物模型，利用连续注射D-半乳糖的方法，使动物在短期内发生氧化/抗氧化功能失调，人为复制出过氧化衰老损伤动物模型。但在保健食品抗氧化功能评价中，该模型的复制存在D-半乳糖染毒剂量、染毒途径、染毒时间及脏器指标选择不明和评价时间较长等缺点，另外加上实验大鼠个体之间差异，所以这种用于筛选和评价抗氧化衰老药物的大鼠模型所实施得到的结果往往缺乏一定的准确性和可信性^[4]。为全面系统科学地筛选和开发抗氧化衰老新药，因此，一种具有统一、量化、特异性强、快速、科学而全面等特点的用于筛选和评价抗氧化衰老药物的大鼠模型的方法亟待构建^[5]。

代谢组学是继蛋白组学之后发展起来的一种全新的组学技术，利用高分离效率、高灵敏度及低检测限的先进分析仪器，以生物体内的小分子内源性代谢物的动态变化规律从整体来阐明机体生理病理变化趋势，在定性、定量分析研究疾病进展规律和药效关系等方面具有广泛的应用^[6]。近年来研究发现，诸如代谢性疾病和恶性肿瘤等疾病发生发展过程中，机体基础生化代谢均发生了明显变化，代谢组学为复杂疾病的筛检和早期诊断提供崭新的技术方法。

参考文献

[1]王珂欣,高丽,段丹丹,等.基于～1H-NMR代谢组学的黄芩素干预D-半乳糖致衰老大鼠作用研究[J].中草药,2017,48(3):511-518.

[2]侯吉颖,陈雄斌,陈粼波,等.D-半乳糖诱导大鼠骨髓基质细胞衰老及其机制[J].基础医学与临床,2017,37(3):307-312.

[3]Gao J,Zhou R,You X,et al.Salidroside suppresses inflammation in aD-galactose-induced rat model of Alzheimer's disease via SIRT1/NF-κB pathway[J].Metabolic Brain Disease,2016,31(4):771-778.

[4]周本宏,汪静.鞣花酸缓解糖尿病小鼠肾损伤的抗氧化机制研究[J].中国药师,2016,19(12):2229-2233.