[发明专利]一种HE染色及调整方法

说明书

技术领域

本发明属于切片染色方法领域，具体是指一种HE染色及调整方法。

背景技术

苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法， 石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内 的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细 胞外基质中的成分着红色。

现有技术中虽然存在HE染色方法，但效果并不佳，实际实施的效果也 不尽如人意，尤其是在操作出现问题，标本效果不达标时，缺少配套的调整 方法。

因此，如何研发一种HE染色及调整方法，能够解决上述问题，便成为 亟待解决的技术问题。

发明内容

本申请解决的主要问题是提供一种HE染色及调整方法，不仅具有常规 染色方法操作简单等优点，还能完善操作方法，对不同染色问题进行调整的 HE染色及调整方法，以解决一种HE染色及调整方法成本高、维护和运行费 用高、操作难度高、难以复制操作的技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种HE染色及调整方法，其技 术方案如下：

一种HE染色及调整方法，其特征在于，包括：

步骤一：将切好的石蜡切片在60-70℃的烤箱中烘烤至少10分钟；

步骤二：将步骤一中得到的切片进行脱蜡；

步骤三：将步骤二中得到的切片使用苏木素染液染色5-8分钟后用水清 洗1分钟，然后使用0.5-1％盐酸酒精分化片刻，在切片颜色由蓝变红后，使 用饱和碳酸锂反蓝片刻，所述切片颜色由蓝变红，之后使用1％伊红酒精浸 染50-100秒；

步骤四：将步骤三中得到的切片经过脱水操作，然后使用二甲苯I进行 透明，时间为50-100秒；

步骤五：将步骤四中得到的切片取出后用中性树胶封固。

优选的，所述步骤一中的脱蜡包括：

步骤1：使用二甲苯I AR浸泡5-7分钟；

步骤2：使用二甲苯IIAR浸泡5-7分钟；

步骤3：使用100％酒精I浸泡50-100秒；

步骤4：使用100％酒精II浸泡50-100秒；

步骤5：使用95％酒精浸泡50-100秒；

步骤6：使用80％酒精浸泡50-100秒；

步骤7：用水清洗。

优选的，所述步骤四还包括使用二甲苯II再次透明，时间为50-100秒。

优选的，所述步骤三中，使用1％伊红酒精浸染之前使用温水或者95％ 酒精浸泡10-80秒。

优选的，所述步骤四中的脱水操作包括：

步骤a：使用95％酒精浸泡50-100秒；

步骤b：使用95％酒精浸泡50-100秒；

步骤c：使用100％酒精I浸泡50-100秒；

步骤d：使用100％酒精II浸泡50-100秒。

优选的，所述步骤五中使用的中性树胶，预先用二甲苯溶解。

优选的，还包括观察染色结果及染色问题，根据染色问题进行调整。

优选的，所述染色问题及对应的调整方法包括：

如染色切片发白，判定为二甲苯脱蜡时间不够，延长脱蜡时间或者更换 二甲苯；

如染色切片发灰，判定为组织固定脱水不佳或者染液配置PH不符，应改 进组织固定脱水程序或者改进染液配方；

如染色切片着色不均匀，判定为染液太少或者分布不均，应增加染液量或 在染液中加入甘油等增强液体亲和力；

如染色切片染色偏蓝，判定为苏木素染色时间过久或者分化不足，应减少 苏木素染色时间或者延长分化时间；

如染色切片染色偏红，判定为伊红染色时间过久或者染色不足，应改进苏 木素染色时间或者减少伊红染色时间；

如核着色欠佳，判定为组织脱水不佳，应加强组织固定脱水，将切片用生 物穿透剂进行处理以利于苏木素着色。

本申请提供的HE染色及调整方法操作简单便利并且灵活、不仅具有常规 染色方法操作简单等优点，还能根据不同的实际情况完善操作方法，对不同染 色问题进行调整，染色效果好。

具体实施方式