[发明专利]一种猪胰岛细胞冻存液及冻存方法有效

专利信息
申请号: 201710374429.0 申请日: 2017-05-24
公开(公告)号: CN106982822B 公开(公告)日: 2018-01-09
发明(设计)人: 王维;易受南;范立青 申请(专利权)人: 湖南赛诺生物科技股份有限公司
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02
代理公司: 长沙市融智专利事务所43114 代理人: 袁靖
地址: 410600 湖南省长*** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 种猪 胰岛 细胞 冻存液 方法
【权利要求书】:

1.一种猪胰岛细胞冻存液,其特征在于,包括以下质量百分比的组分:基础培养基20-40%,猪血清为40-50%,DMSO为7~9%,其余为保护因子;所述的保护因子及其浓度分别为过氧化氢酶100~200μg/ml,生育酚10~50μg/ml,海藻糖0.01~0.1mml/L,细胞凋亡抑制剂Z-VAD-FMK10~30μΜ。

2.根据权利要求1所述的猪胰岛细胞冻存液,其特征在于,基础培养基40%,猪血清为50%,DMSO为7~9%,其余为保护因子;所述的保护因子及其浓度分别为过氧化氢酶100~200μg/ml,生育酚10~50μg/ml,海藻糖0.01~0.1mml/L,细胞凋亡抑制剂Z-VAD-FMK10~30μΜ。

3.根据权利要求1所述的猪胰岛细胞冻存液,其特征在于,氧化氢酶浓度为150μg/ml,生育酚浓度为20μg/ml,海藻糖浓度为0.05mml/L,细胞凋亡抑制剂Z-VAD-FMK浓度为20μΜ。

4.使用权利要求1或2或3所述的猪胰岛细胞冻存液的冻存方法,其特征在于,细胞冻存悬液中冻存密度为1×104-1×105IEQ/mL。

5.使用权利要求1或2或3所述的猪胰岛细胞冻存液的冻存方法,其特征在于:三个降温经历的温度区间及其降温速度:

降至温度>-25℃,1℃/min的降温速度;

降至-25℃≥温度≥-40℃,0.25℃/min的降温速度;

降至‐40℃>温度≥‐80℃,5℃/min的降温速度。

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