[发明专利]一种鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌的指示材料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌的指示材料，其特征在于，所述鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌的指示材料为万古霉素和聚乙二醇修饰的金纳米粒子，所述万古霉素：氯金酸的合成摩尔比为0.5~20:1，所述聚乙二醇为一端修饰巯基的聚乙二醇，分子量为100-200。

2.权利要求1所述的一种鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌指示材料的制备方法，其特征在于，包括如下具体步骤：

1）向一定浓度的氯金酸水溶液中加入一定量的万古霉素水溶液，构成万古霉素：氯金酸的摩尔比为0.5~20:1的混合液；

2）加入适量氢氧化钠溶液将上述混合液的pH值调至弱碱性，在室温搅拌下反应4小时，加入少量聚乙二醇，搅拌下反应1小时，离心收集沉淀，用超纯水洗涤沉淀后离心分离，沉淀重悬于超纯水中备用。

3.根据权利要求2所述的鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌指示材料的制备方法，其特征在于，所述混合液的pH值调至碱性，碱性的pH范围为10-14。

4.根据权利要求2所述的鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌指示材料的制备方法，其特征在于，所述聚乙二醇为一端修饰巯基的聚乙二醇，分子量为100-200。

5.一种权利要求1所述的鉴别革兰氏细菌的指示材料在鉴别革兰氏细菌方面的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的鉴别革兰氏细菌方面的应用具体是通过目视比色法鉴定革兰氏阳性/阴性细菌，目视比色鉴定是通过万古霉素修饰的金纳米粒子的红色结合银染色法形成黑色实现的，具体步骤如下：将含有一定量未知种类的革兰氏阳性菌/阴性菌的溶液通过离心分离的方法洗涤后，与鉴别革兰氏阳性细菌和阴性细菌的指示材料的悬浮液充分混合，室温下反应30-60分钟，将少量反应后的混合液滴在膜上形成斑点，待膜上斑点晾干后，斑点显红色的是革兰氏阳性细菌，不显色的是革兰氏阴性细菌；或在这些斑点上继续滴加银染试剂，1分钟后，将膜置于硫代硫酸钠溶液中漂洗60秒钟，斑点显黑色的是革兰氏阳性细菌，不显色的是革兰氏阴性细菌。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的膜是醋酸纤维素膜或组成为纤维素的滤纸。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的银染试剂由氢醌、硝酸银和柠檬酸盐或醋酸盐构成。