[发明专利]包含IPS细胞提取物的抗衰老组合物

权利要求书

1.一种包含IPS细胞提取物的抗衰老组合物，其特征在于，包含IPS细胞提取物，葡多酚和β-胡萝卜素。

2.根据权利要求1所述包含IPS细胞提取物的抗衰老组合物，其特征在于，所述IPS细胞提取物，葡多酚和β-胡萝卜素的质量配比为5:1～3:2～4。

3.根据权利要求1或2所述包含IPS细胞提取物的抗衰老组合物，其特征在于，所述IPS细胞提取物的制备方法为：

S1.饲养层细胞的准备：用2.5mL、0.5％明胶铺T75细胞培养瓶并覆盖全部底部，37℃培养箱放置45min后，加入37℃预孵育过10min的细胞完全培养基13mL，加入细胞浓度为1.5×10⁵cells/mL，体积为15mL的CF-1小鼠胚胎成纤维细胞进行培养，饲养层细胞培养第二至三天，饲养层细胞生长密度达80-90％时可以接种诱导多能干细胞；

S2.诱导多能干细胞的培养：将培养获得的IPS细胞悬液，按体积比1:15～1:25接种到预铺有饲养层细胞的T75细胞培养瓶中于37℃的CO₂培养箱中培养；

S3.细胞提取物提取：吸出T75细胞培养瓶中培养液，用PBS清洗2～3次，然后加2～3mL细胞裂解液溶解细胞，然后收集到离心管中，离心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃PBS溶液透析8小时；将透析袋内溶液冷冻干燥，保存在-80℃冰箱。

4.根据权利要求3所述包含IPS细胞提取物的抗衰老组合物，其特征在于，所述IPS细胞提取物的制备方法步骤S1中所用细胞完全培养基成分为以：DMEM/F12为基础培养基，还添加10％胎牛血清，4g/L大豆蛋白，3mM的L-谷氨酰胺，1mM丙酮酸钠，7.5mg/L甘氨酰丙氨酸，0.5mg/L海藻糖和0.15mg/L葡多酚。

5.根据权利要求1或2所述包含IPS细胞提取物的抗衰老组合物，其特征在于，所述葡多酚提取方法为：将葡萄皮和葡萄籽在氮气流保护下进行破碎后，加入石油醚脱脂，真空抽干后，加入30mL 65％乙醇在45℃恒温水浴锅中浸提2h，过滤，真空包装即得。