[发明专利]禾谷孢囊线虫的Ha‑62292蛋白、编码基因及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种来源于禾谷孢囊线虫的Ha-62292蛋白、编码基因及其应用。

背景技术

禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae)是一种固着型植物内寄生线虫，主要危害小麦大麦燕麦等禾本科植物的根系，造成严重的产量损失，分布广泛。目前已经在我国的河南、安徽、山东、青海、宁夏、陕西等13个省市地区发现和报道(苏致衡,黄文坤,郑国栋,张宏嘉,刘淑艳,彭德良.北京地区小麦禾谷孢囊线虫病发生动态调查.植物保护,2013,(01):116-120.)(赵洪海,杨远永,彭德良,刘峰.小麦禾谷孢囊线虫在山东省的分布新报道和发生特点浅析.青岛农业大学学报(自然科学版),2011,(04):261-266.)(赵杰,钮绪燕,张管曲,彭德良,康振生.陕西省中南部地区小麦禾谷孢囊线虫的发生与分布.西北农业学报,2011,(06):181-185.)(黄文坤,叶文兴,王高峰,龙海波,欧师琪,彭德良.宁夏地区禾谷孢囊线虫的发生与分布.华中农业大学学报,2011,(01):74-77.)(陈新,周洪友,马玺.内蒙古中西部地区小麦禾谷孢囊线虫的发生分布.植物保护,2009,(05):114-117.)(侯生英,彭德良,王爱玲,黄文坤,耿贵工,张贵.青海省小麦孢囊线虫病调查初报.青海大学学报(自然科学版),2008,(05):84-86.)(杨传广,吴慧平,檀根甲,王月英.安徽省小麦孢囊线虫田间分布及危害调查.植物保护,2008,(02):107-110.)。该种线虫适应低温，通常在冬季之前就可开始侵染，侵染后的幼虫在寄主体内过冬，并在第二年开春后继续侵染和发育，一年只发生一代(向桂林,宋志强,梁旭东,胡小斌,亓竹冉,王暄,李红梅.禾谷孢囊线虫的田间侵染规律及垂直分布研究.麦类作物报,2013,(04):789-794.)。

由于禾谷孢囊线虫寄主范围窄、侵染周期长、研究背景不明，其致病机制研究相对较落后。随着效应蛋白作为病原物致病机制的关键因素的持续研究开发，禾谷孢囊线虫相关研究也得到进一步增长(彭德良.重要植物线虫致病相关基因研究进展.中国植物病理学会.中国植物病理学会2006年学术年会论文集.中国植物病理学会:,2006:10.)。随着基因表达和功能研究相关技术的成熟，RNA表达定量、定位分析、RNAi等均可应用到禾谷孢囊线虫中(黄文坤,彭德良,彭焕.RNA干扰技术在植物寄生线虫中的应用.农业生物技术学报,2009,(01):170-175.)。借鉴于其它植物寄生线虫的研究方法，禾谷孢囊线虫效应蛋白的研究已取得长足的进步，例如内切葡聚糖酶、细胞壁扩展蛋白、膜联蛋白等一些具有明显促进寄生作用的效应蛋白在禾谷孢囊线虫中被发现(龙海波.小麦禾谷孢囊线虫β-1，4-内切葡聚糖酶和细胞壁扩展蛋白基因的克隆及功能分析.中国农业科学院,2012.)，并且这些被发现的基因可应用于寄主介导的RNA干扰或异位表达以抑制病原线虫的侵入危害。

发明内容

本发明的目的是提供一种来源于禾谷孢囊线虫的Ha-62292蛋白及其编码基因，从表达时间上来看，主要集中在侵染前二龄、侵染后二龄第1天。而从表达部位来看，其主要集中在食道腺细胞中。实验表明该基因在禾谷孢囊线虫寄生致病过程中发挥重要作用，可作为植物抗线虫工程的靶标基因。

一种来源于禾谷孢囊线虫的Ha-62292蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

编码禾谷孢囊线虫的Ha-62292蛋白的基因。

编码禾谷孢囊线虫的Ha-62292蛋白的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

禾谷孢囊线虫的Ha-62292蛋白在禾谷孢囊线虫防控中的应用。

所述应用为将Ha-62292蛋白作为禾谷孢囊线虫的寄主防御反应的诱导剂，用于激活寄主免疫反应增强对线虫抗性，或者获得在寄主中的Ha-62292蛋白的受体蛋白，转移到不含有该种受体蛋白的寄主中以获得抗性。

本发明的序列表Ha-62292蛋白，长度为218个氨基酸；如SEQ ID NO：1所述；编码该蛋白的基因长度为654个核苷酸，其序列如SEQ ID NO：2所示。上述蛋白来源于禾谷孢囊线虫，但来源于其它孢囊线虫甚至根结线虫的此蛋白也属于本发明保护范围。此蛋白可通过生物技术直接人工合成，先合成其编码基因，连接到表达载体后再导入生物体内表达得到。