[发明专利]集捕获培养检测一体化的微流控辐射损伤监测装置及方法在审
申请号: | 201710353411.2 | 申请日: | 2017-05-18 |
公开(公告)号: | CN107228847A | 公开(公告)日: | 2017-10-03 |
发明(设计)人: | 王俊生;赵文爽 | 申请(专利权)人: | 大连海事大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司21212 | 代理人: | 李洪福 |
地址: | 116026 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 捕获 培养 检测 一体化 微流控 辐射损伤 监测 装置 方法 | ||
1.集捕获培养检测一体化的微流控辐射损伤监测装置,其特征在于:包括微流控芯片组件(6)、激发光源组件(3)、光场增强组件(8)、显微成像组件(5)、微控制器(2)、电动移动组件(4)、真空泵(7)和上位机处理组件(1);
所述微控制器(2)通过数据线分别与上位机处理组件(1)、激发光源组件(3)、光场增强组件(8)、电动移动组件(4)和真空泵(7)连接;所述上位机处理组件(1)通过数据线与显微成像组件(5)连接;所述真空泵(7)通过管道与微流控芯片组件(6)相连接;
所述显微成像组件(5)包括荧光显微物镜(14)、分光镜(13)、绿色滤光片(12)、聚光透镜组(11)和摄像头(10),所述聚光透镜组(11)包括平凸透镜和双凸透镜;所述荧光显微物镜(14)通过光路依次与分光镜(13)、绿色滤光片(12)、聚光透镜组(11)和摄像头(10)连接;所述摄像头(10)通过总线(9)与上位机处理组件(1)连接;
所述微流控芯片组件(6)由六个相同的微流控芯片组成,所述微流控芯片由基片及固定在基片上的涂层组成,所述基片为玻璃片,所述涂层为聚二甲基硅氧烷涂层,所述涂层表面设有样品入口(15)、培养槽(16)、培养液入口(17)、侧吸口(18)、闸门(19)及废液出口(20);样品入口(15)用于添加秀丽隐杆线虫;培养槽(16)通过通道Ⅰ(21)和通道Ⅱ(22)与样品入口(15)相连,用于培养秀丽隐杆线虫;培养液入口(17)通过通道Ⅴ(25)和通道Ⅵ(26)与培养槽(16)相连,用于添加培养液;侧吸口(18)通过通道Ⅶ(27)与培养槽(16)相连,用于产生负压固定秀丽隐杆线虫;闸门(19)用于使培养槽(16)与外部空气隔绝;废液出口(20)通过通道Ⅲ(23)和通道Ⅳ(24)与培养槽(16)相连,用于排除废液;所述通道Ⅱ(22)只允许单个秀丽隐杆线虫通过并限制秀丽隐杆线虫逃出培养槽(16);所述通道Ⅳ(24)和通道Ⅵ(26)用于限制秀丽隐杆线虫逃出培养槽(16);
所述激发光源组件(3)用于激发秀丽隐杆线虫使其产生荧光,
所述光场增强组件(8)用于增强秀丽隐杆线虫视场内的光强,提高秀丽隐杆线虫明场视频及明场图像获取时的对比度;
所述显微成像组件(5)用于获得秀丽隐杆线虫的明场视频、明场图像及荧光图像;
所述微控制器(2)用于控制激发光源组件(3)、光场增强组件(8)、显微成像组件(5)、电动移动组件(4)和真空泵(7);
所述电动移动组件(4)用于带动显微成像组件(5)左右移动;
所述真空泵(7)用于使微流控芯片的侧吸口(18)产生负压;
所述上位机处理组件(1)用于存储和处理秀丽隐杆线虫的明场视频、明场图像及荧光图像;通过明场视频及明场图像得到秀丽隐杆线虫的运动特征,所述运动特征包括秀丽隐杆线虫运动频率和运动幅度;通过荧光图像得到秀丽隐杆线虫的内部特征,所述内部特征包括秀丽隐杆线虫发光位点数目和总荧光强度。
2.集捕获培养检测一体化的微流控辐射损伤监测方法,其特征在于:包括如下步骤:
A、将秀丽隐杆线虫加入到微流控芯片的样品入口(15),通过注射器(28)控制使秀丽隐杆线虫从样品入口(15)经过通道Ⅰ(21)、通道Ⅱ(22)进入培养槽(16),培养过程中定期更换培养液;
B、通过微控制器(2)控制显微成像组件(5)依次对微流控芯片组件(6)中每个微流控芯片中的秀丽隐杆线虫进行数据采集;数据采集流程依次包括:明场视频采集、明场图像采集、荧光图像采集;
C、上位机处理组件(1)对步骤B中获得的秀丽隐杆线虫数据进行分析,以此评估秀丽隐杆线虫辐射损伤程度,具体评估方法如下:
C1、通过运动频率评估秀丽隐杆线虫的辐射损伤程度;运动频率越小表明秀丽隐杆线虫受辐射损伤程度越严重;
C2、通过运动幅度评估秀丽隐杆线虫的辐射损伤程度;运动幅度越小表明秀丽隐杆线虫受辐射损伤程度越严重;
C3、通过发光位点数目评估秀丽隐杆线虫的辐射损伤程度,发光位点数目越多,表明秀丽隐杆线虫受辐射损伤的程度越严重;
C4、通过总荧光强度评估秀丽隐杆线虫的辐射损伤程度,荧光强度越强表明秀丽隐杆线虫受辐射损伤程度越严重;
C5、对以上四个指标综合评估,最终得出秀丽隐杆线虫受辐射损伤程度。
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