[发明专利]一种广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法

说明书

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取四方藤植株的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽；所述的外植体诱导培养操作的外植体诱导培养基包括：MS培养基、0.5～2.0mg/L 6‑BA、0.2～0.5mg/L NAA、0.01～0.05mg/L Paclobutrazol、25～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.5～1.0g/L活性炭，pH为5.4～5.8，本发明选择四方藤带节茎段为外植体，经诱导培养、增殖培养、生根培养以及移栽等步骤，其诱导率达到了88.5％以上，成活率达到了95％以上，实现了四方藤的组培快繁，从而实现了本发明的目的。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法。

背景技术

四方藤(Cissus Pteroclada Hayata)，别名红四方藤、翼枝白粉藤、春根藤等，为葡萄科(Vitaceae)白粉藤属(Cissus Linn.)草质藤本植物，常生于阔叶林中，是广西特色瑶族药之一，主要分布于百色、陆川、贺州、博白、靖西等地，在民间广泛用于治疗风湿痹痛、腰肌劳损、外伤、止血等，疗效显著。据《广西中药志》记载，四方藤茎可入药，其味微苦，涩，甘，性平。具有舒筋活络，去瘀生新，治跌打损伤，筋络拘挛等功效。可用于治疗风湿痹痛、腰肌劳损、跌打损伤、内外伤出血、胃及十二指肠出血、疼痛等症，并可用于产后保健药浴。

作为一种具有独特药效的瑶族药，目前四方藤多处于野生状态，但由于药农无序采挖，其野生资源锐减，因此人工栽培四方藤显得十分迫切！四方藤可通过种子、扦插、压条等方式繁殖，但均存在周期长、繁殖系数低下等缺点，限制了四方藤种苗的生产。因此有必要建立四方藤的组培快繁体系，本发明选择四方藤带节茎段为外植体，经诱导、增殖、生根、炼苗以及移栽等步骤，建立了四方藤的组培快速繁殖体系。本发明具有周期短、成本低廉、繁殖系数高等特点，可直接用于四方藤种苗的工厂化生产，对于促进瑶族药药四方藤的植物资源开发具有重要的现实意义。

至目前为止，国内外尚未有四方藤组织培养技术的报道，也未有四方藤组培快繁专利的申请。

发明内容

本发明的目的是提供一种广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法，本发明选择四方藤带节茎段为外植体，经诱导培养、增殖培养、生根培养以及移栽等步骤，其诱导率达到了88.5％以上，成活率达到了95％以上，实现了四方藤的组培快繁，从而实现了本发明的目的。

本发明提供的技术方案为：一种广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取四方藤植株的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽；

所述的外植体诱导培养操作的外植体诱导培养基包括：MS培养基、0.5～2.0mg/L6-BA、0.2～0.5mg/LNAA、0.01～0.05mg/L Paclobutrazol、25～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.5～1.0g/L活性炭，pH为5.4～5.8。

在上述的广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法中，所述的外植体诱导培养操作的方法为：将采集得到的作为外植体的四方藤消毒后剪切成2.0～2.5cm的带节藤茎并接种到诱导培养基中，置于25～28℃进行全暗培养25～35天即可诱导形成不定芽。

在上述的广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法中，所述的增殖培养操作所用到的增殖培养基包括：MS培养基、1.0～2.0mg/L 6-BA、0.5～1.0mg/LNAA、20～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.1～0.5g/L活性炭，pH为5.4～5.8。

在上述的广西特色瑶族药四方藤的组培快繁方法中，所述的增殖培养操作具体为：将外植体诱导培养操作得到的不定芽切成长1.5～2.0cm的茎段并接种到增殖培养基中培养20～30天即可实现不定芽的增殖。