[发明专利]一种棉花耐低钾种质的鉴定方法

权利要求书

1.一种棉花耐低钾种质的鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将棉花种子平分两部分，分别进行水培培养和蛭石培养各6天；选择生长整齐的幼苗，用刀片分别切取水培条件下幼苗中上部根系及蛭石培养条件下主根根系作为待测样品；

同时，以耐低钾材料中571和钾敏感品种新棉99B分别作为耐低钾对照样品和钾敏感对照样品；

(2)将待测样品及对照样品分别先用去离子水冲洗干净，浸没于蒸馏水中，再浸入测试液中平衡；

(3)将步骤(2)处理好的待测样品及对照样品分别转入新的测试液中，采用非损伤性微测技术分别测定低钾胁迫水培培养6天和蛭石培养发苗6天的棉花幼苗的钾离子流速；

(4)通过比较待测组织样品与对照样品的钾离子流速，判断所述棉花种子是否为耐低钾性较强的棉花种质材料。

2.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(1)中，水培及蛭石培养条件：在光照或钠灯培养室内进行，光照强度为450μmol m^-2s^-1，光照时间为14h，白天温度为28±2℃，夜间温度为20±2℃。

3.根据权利要求1或2所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述水培培养条件为：将种子均匀播于用去离子水冲洗过的沙床，上面盖一层布后再覆薄沙一层，4d后将幼苗转移至改良的Hoagland营养液中进行低钾胁迫培养。

4.根据权利要求3所述的鉴定方法，其特征在于，所述改良的Hoagland营养液配方为：2.5mM Ca(NO₃)₂,1mM MgSO₄,0.5mM (NH₄)H₂PO₄,0.1mM Fe-Na-EDTA,0.2μM CuSO₄,1μM ZnSO₄,20μM H₃BO₃,5pM(NH₄)₆Mo₇O₂₄,1μM MnSO₄和0.1mM KCl。

5.根据权利要求1或2所述的鉴定方法，其特征在于，所述蛭石培养条件为：将种子播种于盛有去离子水洗过蛭石的容器中，每天喷水保持蛭石的湿度。

6.根据权利要求1-5任一所述的鉴定方法，其特征在于，所述测试液配方：0.1mmol L^-1KCl、0.1mmol L^-1CaCl₂、0.3mmol L^-1MES，pH 6.0。

7.根据权利要求1-6任一所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(3)中，所述水培培养的测定部位为：距幼苗根尖300-600μm，优选300μm处。

8.根据权利要求1-6任一所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(3)中，所述蛭石培养的测定部位为：距幼苗根尖600-800μm，优选600μm。

9.根据权利要求1-8任一所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(3)中，待测试环境达到稳定状态后测试时间持续5～8min。