[发明专利]一种药用白芨组织培养种苗繁育方法

说明书

本发明公开了一种药用白芨组织培养种苗繁育方法，旨在提供一种具有繁殖速度快，质量高、适合规模化种苗繁育等优点的一种药用白芨组织培养种苗繁育方法，其技术方案要点是，包括以下培育步骤：S1：外植体选取，S2：增殖培养，S3：壮苗培养，S5：生根诱导，通过以上步骤，能够克服药用白芨种子萌发率低，种苗培育难；繁殖速度慢等瓶颈；能够快速、优质、高效的进行种苗繁育，以满足大规模种植的需要，使白芨能够工厂化和规模化培育。

技术领域

本发明涉及植物繁殖技术领域，特别涉及一种药用白芨组织培养种苗繁育方法。

背景技术

白芨是兰科白芨属的一种，也称白及。多年生草本，高20～50厘米，叶4～5枚，基部互相套叠成茎状，中央抽出花葶。总状花序具数朵花；花紫色或淡红色，直径约5厘米，由3枚萼片、2枚花瓣和1枚特化的唇瓣组成；唇瓣3裂，上面有纵褶片；雄蕊与花柱合生而成合蕊柱，合蕊柱顶端有一个花药，前上方有一个柱头凹穴。地下有粗厚的根状茎，如鸡头状，富粘性，含白及胶质，即白及甘露聚糖，可供药用，有止血补肺、生肌止痛之效，也可供作糊料。

白芨花色艳丽，出入药外，其也是一种很好的景观植物，因此市场对白芨的需求十分旺盛。由于市场需求的扩大，近年来我国大部分地区的野生白芨遭到过度采挖，导致其野生自然资源急剧减少，濒临灭绝，被国家列为重点保护的野生药用植物之一。

为保护白芨野生资源，人工繁育和栽培白芨势在必行。

目前，公告号为CN106416972A的中国专利公开了一种快速培养白芨种苗的方法，它包括将白芨的种子经萌发培养、原球茎分化培养、鳞茎诱导培养和驯化后，得到白芨幼苗的方法。

这种快速培养白芨种苗的方法虽然整齐性较好，但原球茎退化快、变异比例高，种苗弱小，移栽成活率低,无法满足大规模种植需求。

发明内容

本发明的目的是提供一种药用白芨组织培养种苗繁育方法，其具有繁殖速度快，质量高、适合规模化种苗繁育等优点。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种药用白芨组织培养种苗繁育方法，包括以下步骤：S1：外植体选取，选择无菌裸胚萌发并生根的组培苗为外植体，保持外植体处于无菌状态；

S2：增殖培养，将无菌状态外植体的叶片和根系切除部分或全部，接种于固体增殖培养基中，进入暗培养阶段培养2～7天，然后进入光照培养阶段增殖培养8～16周，将增殖率控制在3倍，增殖获得团芽；

S3：壮苗培养，每12周，将经过增殖阶段培养的团芽进行分割成单芽，并切除部分或全部叶片，转接到预制好的壮苗培养基中，暗培养2～7天，然后光照培养2～4周；S5：生根诱导，优选壮苗培养得到的高度为2cm以上的无根组培苗，从壮苗培养基中取出并接种于生根培养基中，暗培养2～7天，光照培养4～8周，至植株具有有效健壮根1～3条，完成生根。

通过采用上述技术方案，由于白芨的种子非常小，而且是没有胚乳的裸胚，因此在自然状况下很难萌发和生长，实生苗的栽培比较困难，常用的方法主要是靠根状茎分株繁殖，而分株繁殖的繁殖系数低，繁殖速度慢，无法满足大规模的种植需求。

而本方法是将外植体的根系、叶片切除后，在高浓度细胞分裂素作用下，促使休眠腋芽萌发并不断诱导出丛生团芽，然后将丛生团芽分割成单个芽，转接入壮苗培养基进行复壮培养，再转接入生根培养基中进行生根诱导，能够大大提高繁育培养的效率，降低繁殖周期，增加繁育速度，减少耗种量，以满足大规模种植的需要，使白芨能够工厂化和规模化培育。

由于白芨种子是没有胚乳、不具种皮的裸胚，常规播种很容易使种子散失生命力，而通过无菌播种，诱导种子无菌萌发，并以此为外植体进行组织培养快速扩繁，以使出苗率大大提高，且通过本方法能够促使萌芽快速生长出苗，出苗速度快并且壮大，保证植株拥有较高的存活率。