[发明专利]棉花枯萎病防治菌剂

说明书

技术领域

本发明涉及植物病害生物防治领域，具体涉及棉花枯萎病防治菌剂。

背景技术

棉花枯萎病是棉花的重要病害之一，棉花枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的全球性棉花病害。棉花枯萎病是典型的维管束土传病害，在棉花的整个生育期均可发生。利用化学农药具有抑制有益微生物生长、导致药效下降、成本高、危害环境等缺点。

随着人们对绿色农业、有机农业的发展需求，生物防治成为病虫害防治的新措施，同样成为棉花黄萎病防治的新方向。目前，生物防治在预防棉花黄萎病的研究上已经取得了一定成果，但实际使用中遇到很多困难，例如，如何持久抗病性；生防菌剂如何正常定殖并发挥抗病效果；如何顺利将生防菌剂施到靶标位点。

发明内容

本发明从棉花内生细菌为出发点，从棉花茎秆中定向分离，筛选了一株可水解β-1,4糖苷键的内生细菌YUPP-10，发现YUPP-10对棉花枯萎病病原菌细胞壁几丁质具有水解作用，鉴定并检测了YUPP-10对棉花枯萎病的控制作用。其保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC No：M 2017141。

该菌形态学特征为：革兰氏阳性菌，菌体细胞杆状，末端方，在LB培养基上呈灰白色，不透明，表面较粗糙，似融蜡状，边缘呈锯齿状，微有光泽。但传统的形态学鉴定稳定性较差，会有一定的局限性，分子生物学成为新分类鉴定的重要途径，利用传统的形态学结合分子生物学的手段，对YUPP-10进行鉴定，确定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。

YUPP-10为棉花内生细菌，存在于棉花组织内部，却没有侵染寄主而造成寄主植物病变。内生细菌能与寄主形成一系列不同关系，如：共生、互惠、共栖和营养寄生等。此外，内生细菌在植物中的定殖类似于病原菌的生态位，适合作为生物防治资源。

生防细菌通过与病原菌竞争生态位、产生抑菌物质抑制病原菌、寄生于病原菌和交叉保护等作用方式直接抑制病原菌的生长和扩散；一些生防菌或其代谢产物能够诱导植物产生系统抗性，从而产生对病原菌的抵抗力。本发明获得的棉花内生细菌YUPP-10，对尖孢镰刀菌有直接抑制作用，其培养液对棉苗进行灌根处理，使棉花产生对枯萎病的抗病性。细菌自身繁殖速度快，极易获取，且应用操作简便，在生产上适宜推广应用。

根据本发明的具体实施方式，本发明提供了一种棉花枯萎病防治菌剂，所述菌剂包含蜡状芽孢杆菌YUPP-10，其保藏号为CCTCC No：M 2017141。

根据本发明的具体实施方式，本发明提供了一种棉花枯萎病防治菌剂，所述蜡状芽孢杆菌YUPP-10的浓度为1×10⁶cfu/mL、1×10⁷cfu/mL或1×10⁸cfu/mL。

根据本发明的具体实施方式，本发明提供了一种尖孢镰刀菌抑菌剂，所述抑菌剂包含蜡状芽孢杆菌YUPP-10，其保藏号为CCTCC No：M 2017141。

根据本发明的具体实施方式，本发明提供了一种尖孢镰刀菌抑菌剂，所述蜡状芽孢杆菌YUPP-10的浓度为1×10⁶cfu/mL、1×10⁷cfu/mL或1×10⁸cfu/mL。

根据本发明的具体实施方式，本发明提供了保藏号为CCTCC No：M 2017141的蜡状芽孢杆菌YUPP-10用于防治棉花枯萎病的应用。

根据本发明的具体实施方式，本发明提供了保藏号为CCTCC No：M 2017141的蜡状芽孢杆菌YUPP-10用于抑制尖孢镰刀菌的应用。

本发明的有益效果是：

(1)YUPP-10分离自棉花维管束，对人、畜、农作物无毒害作用，对环境无污染破坏。YUPP-10为蜡状芽孢杆菌，该菌分布广泛，在水体、空气、土壤、植物组织和动物肠道中均有存在。能够作为水体和土壤改良剂、工程菌和生防制剂等。

(2)YUPP-10能够在人工培养基上大量培养，且在适宜条件下，细菌以稳定的几何级数极快增长，以体积比5％的接种量，培养24h便可应用，有利于工厂大规模生产和推广应用。

(3)YUPP-10对棉花枯萎病病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)具有明显的抑制效果，抑制率达到64.68％，对尖孢镰刀菌菌丝有溶解作用。