[发明专利]一种三叶青快繁技术及用于三叶青组织培养的光触媒诱导培养基

说明书

本发明公开了一种三叶青快繁技术及用于三叶青组织培养的光触媒诱导培养基，包括如下步骤：(1)取三叶青外植体，将其用流水冲洗2～3小时；(2)将冲洗后的三叶青外植体用体积分数为60～70％的乙醇溶液浸泡1～3分钟；(3)将经酒精溶液浸泡的三叶青外植体使用0.1％氯化汞溶液冲洗1～2分钟；(4)将经氯化汞溶液消毒的三叶青外植体使用蒸馏水冲洗3～5次，并使用滤纸吸干其表面的水分；(5)将经上述消毒处理的三叶青外植体斜插入诱导培养基中培养。本发明可明显提高三叶青块根组织的成活率。本发明提供的三叶青快繁技术可快速得到三叶青的药效部位，缩短了三叶青生长周期，也可应用于三叶青大面积种植，有利于保护野生三叶青种质资源。

技术领域

本发明属于组织培养领域，具体为一种三叶青快繁技术及用于三叶青组织培养的光触媒诱导培养基。

背景技术

三叶青是葡萄科多年生蔓生藤本植物，整株均可入药，地下块根药效更加。三叶青块根粗壮，一般常见有纺锤形、椭圆形或卵圆形。叶互生，叶柄2-4cm，掌状复叶。小叶片呈狭椭圆形至狭卵状椭圆形，长约3-7cm，宽约1.5-3cm。中央小叶较两侧者略大，叶缘具刺状疏齿，叶子两面都无毛，或仅在下面中脉上被毛。由于传统三叶青繁殖方式周期长、收益低，因此寻找一种快速繁殖三叶青的方法是亟待解决的问题。

发明内容

本发明提供了一种三叶青快繁技术及用于三叶青组织培养的光触媒诱导培养基，该光触媒诱导培养基可明显提高三叶青块根组织的成活率。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:

一种三叶青快繁技术，包括如下步骤：

(1)取三叶青外植体，将其用流水冲洗2～3小时；

(2)将冲洗后的三叶青外植体用体积分数为60～70％的乙醇溶液浸泡1～3分钟；

(3)将经酒精溶液浸泡的三叶青外植体使用0.1％氯化汞溶液冲洗1～2分钟；

(4)将经氯化汞溶液消毒的三叶青外植体使用蒸馏水冲洗3～5次，并使用滤纸吸干其表面的水分；

(5)将经上述消毒处理的三叶青外植体斜插入诱导培养基中培养。

更加具体的，步骤(1)中冲洗时间为2小时。

作为优选，步骤(2)中乙醇溶液的体积分数为65％。

本发明还提供了一种用于三叶青组织培养的诱导培养基，按重量计，该诱导培养基包括如下组分：硝酸铵0.8-1.2g、磷酸二氢钾0.4-0.6g、氯化钠0.8-1.2g、葡萄糖1.2-1.4g、抗菌剂0.1-0.5g、氯化钙0.2-0.3g、甘氨酸0.04-0.06g、维生素0.04-0.08g、七水硫酸镁0.2-0.4g、纯净水80-100g、蔗糖1-3g、生长素0.01-0.02g、细胞分裂素0.03-0.05g、激动素0.01-0.02g以及玉米素0.01-0.02g。

作为优选，所述抗菌剂包括纳米二氧化钛、纳米氧化锌以及氨苄中的至少一种。

作为优选，所述维生素包括维生素B1和维生素B6中的至少一种。

作为优选，所述诱导培养基按重量计，包括如下组分：硝酸铵0.8-1.2g、磷酸二氢钾0.4-0.6g、氯化钠0.8-1.2g、葡萄糖1.2-1.4g、纳米二氧化钛0.2-0.3g、纳米氧化锌0.2-0.3g、氨苄0.01-0.03g、氯化钙0.2-0.3g、甘氨酸0.04-0.06g、维生素B1 0.02-0.04g、维生素B2 0.02-0.04g、七水硫酸镁0.2-0.4g、纯净水80-100g、蔗糖1-3g、生长素0.01-0.02g、细胞分裂素0.03-0.05g、激动素0.01-0.02g以及玉米素0.01-0.02g。