[发明专利]玉米耐盐基因ZmHKT2;1及其应用

权利要求书

1.一种编码玉米HKT转运蛋白的基因ZmHKT2;1，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种玉米HKT转运蛋白，其特征在于：

1) 由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成，或

2) 在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或几个氨基酸所获得的具有同等活性的蛋白质。

3.含有权利要求1所述基因ZmHKT2;1的重组表达载体pCAMBIA3301-ZmHKT2;1。

4.含有权利要求1所述基因ZmHKT2;1的工程菌。

5.权利要求1所述的基因ZmHKT2;1在转化植物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述应用是在烟草内转化所述基因ZmHKT2;1，提高烟草的耐盐能力。

7.根据权利要求5 或6 所述的应用，其特征在于，所述应用的步骤包括：

载体pCAMBIA3301-ZmHKT2;1通过液氮冻融法转入农杆菌EHA105中；在含有50μg/mL卡那霉素、pH7.0的液体LB培养基中，振荡培养至OD600值在0.6-1.0之间，4000rpm离心10min收集菌体，用侵染培养基（MS培养基附加2g/L MES，pH5.8）重悬菌体至OD600为1.0，28℃温浴2-4h左右备用；将烟草无菌苗叶片切成5mm×5mm的小块（即外植体）备用；将切好的烟草叶片小块浸入上述制备好的农杆菌悬液中，浸泡10min，期间轻轻晃动2-3次；烟草叶片用无菌滤纸吸干，接种到共培养培养基（MS培养基附加2g/L MES）上，25℃暗光或弱光条件下共培养；烟草叶片共培养3天后转入抑菌培养基（MS培养基附加2mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA、500mg/L头孢霉素）上进行抑菌培养；抑菌培养7天后，再转移至筛选培养基（MS培养基附加2mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA、2 mg/L Basta、250mg/L头孢霉素）中；转化材料每2周用筛选培养基继代一次；筛选继代过程中会有不定芽产生，在不定芽长出3-4片小叶后，可转入生根培养基（MS培养基附加5mg/L Basta、250mg/L头孢霉素）中，培养10天左右不定芽生根，获得再生植株。