[发明专利]一种快速的检测癌胚抗原的比色分析方法

权利要求书

1.一种比色分析的快速的检测癌胚抗原的免疫传感器，其特征在于：按照如下的步骤进行

步骤一、制备Ag₃PO₄/Ag纳米复合材料并将其修饰癌胚抗原抗体，将硝酸银和乙二醇溶液混合均匀形成第一溶液，将Na₂HPO₄·12H₂O 和乙二醇溶液混合均匀形成第二溶液，将第一溶液和第二溶液混合均匀后搅拌1-3小时形成第三溶液，第三溶液在160°C 油浴条件下搅拌30分钟，通过离心和清洗，得到Ag₃PO₄/Ag 纳米球分散液，将CEA抗体加入到Ag₃PO₄/Ag纳米球分散液中，在4 °C下孵育8-12小时，磁性分离并清洗得到抗体标记的Ag₃PO₄/Ag 结合物即Ab₂-Ag₃PO₄/Ag纳米球分散液；

步骤二、制备Fe₃O₄/Ag纳米复合材料并将其修饰癌胚抗原抗体，将四氧化三铁和多巴胺加入到二次水中混合均匀，再将硝酸银加入到该混合溶液中，搅拌5-7小时，通过磁性分离得到沉淀物，经清洗后得到Fe₃O₄@Ag 纳米球分散液，将CEA抗体加入到Fe₃O₄@Ag 纳米球分散液中，在4 °C下孵育8-12小时，磁性分离并清洗得到抗体标记的Fe₃O₄@Ag 结合物即Fe₃O₄@Ag-Ab₁纳米球分散液；

步骤三、将Fe₃O₄@Ag-Ab₁纳米球分散液依次孵育不同浓度的癌胚抗原CEA 30分钟，然后用水清洗2-5次，再用Ab₂-Ag₃PO₄/Ag纳米球分散液孵育30分钟，构建成免疫传感器，加入ABS缓冲液和四甲基联苯胺TMB溶液，通过紫外分光光度计检测TMB的紫外吸收来定量CEA的浓度，通过紫外分光光度计检测TMB的紫外吸收来定量CEA的浓度是指，根据CEA浓度与吸光度成线性相关性建立对应的线性方程为y=0.297 x + 0.176，x是CEA的浓度，单位是纳克/毫升，y是检测的吸光度。

2.根据权利要求1所述的一种比色分析的快速的检测癌胚抗原的免疫传感器，其特征在于：步骤一中，第一溶液中硝酸银的量为1-1.8a毫克，乙二醇的量为20-36a毫升，浓度为0.1毫摩尔/升；第二溶液中Na₂HPO₄·12H₂O的量为20-36a毫升，质量分数为0.5 %，乙二醇的量为20-36a毫升，浓度为0.1毫摩尔/升；CEA抗体的量为20-36a毫升，浓度为0.1毫摩尔/升；步骤二中四氧化三铁的量为1-1.8a毫克；多巴胺的量为15-27a毫克；二次水的量为8-10a毫升；硝酸银的量为11-20a毫克；CEA抗体的量为500-900a微升，浓度为1毫克/毫升；a为正整数。

3.根据权利要求1所述的一种比色分析的快速的检测癌胚抗原的免疫传感器，其特征在于：步骤三中，依次孵育不同浓度的癌胚抗原CEA 30分钟是指依次在浓度为2.5纳克/毫升、2纳克/毫升、1.5纳克/毫升、1纳克/毫升、0.8纳克/毫升、0.5纳克/毫升、0.2纳克/毫升的癌胚抗原CEA中在室温下孵育30 分钟。

4.根据权利要求1所述的一种比色分析的快速的检测癌胚抗原的免疫传感器，其特征在于：步骤三中，Fe₃O₄@Ag-Ab₁的量为1-1.8b毫升，Ab₂-Ag₃PO₄/Ag的量为1-1.8b毫升；ABS缓冲液的量为2-3.6b毫升，pH为3；TMB的量为100-180b微升，浓度为5毫摩尔/升，b为正整数。