[发明专利]一种甘蔗组织培养的繁殖方法

权利要求书

1.一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）选种：选种为种茎选择经过：包括大田块选、收获株选、斩种时段选和下种时芽选4个程序；

2）采种：采种时先削去蔗株的叶片，保留叶鞘，以保护蔗芽，按留种要求不同，采种可分为全茎种、半茎种和梢部种；

3）晒种；

4）砍种；

5）材料处理：选取腋芽、茎尖等利于诱导的植物新生部分作为外植体；

6）培养基配制：配制诱导外植体培养基、诱导腋芽增殖培养基和诱导生根增殖培养基；

7）培养：将外植体洗净消毒，处理好后的材料接入诱导外植体培养基中进行培养，用荧光灯模拟自然光照射，培养时间每天10～15小时，培养温度25～30℃；连续培养10～15天后，观察外植体诱导生长情况，选取外植体诱导产生愈伤组织的培养组，在无菌操作条件下将转绿腋芽边缘褐色部分剥除转入同样培养基中培养；当新生芽长到2厘米时，转入诱导腋芽增殖培养基中培养；重复将诱导的腋芽转入腋芽增殖培养基，直到获得所需数量的腋芽；将诱导的腋芽转入诱导生根增殖培养基中诱导生根，3～8天后，选择根长至3～5厘米的培养组进入炼苗阶段；将成功生根的幼苗在试管中移到自然光照下，继续培养2～3天，不打开瓶口让幼苗接受强光的照射；2～3天后，再开口继续在自然光下练苗1～2天，选择经过炼苗后成活的培养组，从试管中取出幼苗，在自来水中洗掉幼苗根部的培养基；将清洗后的幼苗根部用湿布轻轻包裹，移栽到诱导外植体培养基中；

8）大田移植：移栽前后要充分浇水、防止幼苗受到曝晒，保证土壤湿度、促进幼苗成活、尽快转青；幼苗青后及时施肥，用尿素加复合肥，早施追肥，确保幼苗成活，促进甘蔗早分蘖；甘蔗开始分蘖时，要及时割除主茎，促进甘蔗分蘖，同时要控制无效分蘖；适时翻耕培土，控制杂草，提高成活率。

2.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤4）中砍种时要先剥除叶鞘，将种茎放置在砧板或木垫上，芽向两侧，刀口要利，刀身要薄，落刀要准，做到一刀两断，切口平滑，不破裂，不伤芽，下刀位置在种苗下部节间2/3处，上部节间稍短，占节间的1/3。

3.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤5）中的材料处理在超净工作台上用75%酒精浸泡外植体30秒，然后迅速取出，再用0.1%氯化汞液处理15分钟，用无菌蒸馏水冲洗4～5次后待接种。

4.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤6）中的诱导外植体培养基为MS+BA1mg/L+活性炭1g/L+蔗糖18g/L+琼脂8g/L，所述诱导腋芽增殖培养基为MS+BA5~10mg/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖15~22g/L，所述诱导生根增殖培养基为1/2MS+NAA 2mg/L+IBA0.4mg/L+多效唑2 mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤7）的培养基质先充分浇水，栽植幼苗时，先用筷子或者木棍在基质中插一小孔，然后将小苗轻轻放入小孔中，注意不要弄伤幼苗的根须，栽后把幼苗周围基质压实，栽后轻浇薄水；然后将幼苗移入高湿环境中种植，以备向大田移栽。

6.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤8）大田移植前选择水源稳定充足又有肥力的土地作为甘蔗种植地，并要求深耕细作，移栽甘蔗组培苗要对选好的栽植地深耕20～30 厘米，甘蔗田间种植的行距以1米为佳；每亩基本种植数量在1800～2200株，即行距100厘米，株距为33～42厘米；如果行距为126厘米，则株距为26～33厘米。

7.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤8）大田移植后7天内一定要保持田间土壤湿度在50～60%，2～3天苗返青后要及时施肥；每亩施用施尿素约10公斤，复合肥12公斤，然后用小培土在根系覆盖，小培土厚度4厘米；甘蔗开始分蘖至分蘖高峰期每亩施尿素20公斤，复合肥20公斤；此外要做好田间管理，要经常检查，及时割除主茎，中度耕翻土地，及时除去杂草；施分蘖肥后1个月左右，施尿素20公斤、复合肥40公斤，然后进行大培土，培土高度20厘米以上。

8.根据权利要求1所述的一种甘蔗组织培养的繁殖方法，其特征在于，所述步骤8）大田移植后及时预防治疗病虫害，要做到早发现、早治疗；并通过甘蔗叶覆盖地表以降低水分蒸发的方式保水抗旱。