[发明专利]一种负载替莫唑胺的靶向纳米粒及其制备方法

说明书

本发明提供了一种负载替莫唑胺的靶向纳米粒及其制备方法，该靶向纳米粒的通式为HA‑PAMAM‑COOH‑TMZ，其中HA为透明质酸，PAMAM为树枝状聚合物；COOH为羧基，TMZ为替莫唑胺。本发明采用聚酰胺‑胺树状大分子作为载体，使用丁二酸酐来对PAMAM进行修饰，将PAMAM表面的大部分氨基变为更加安全的羧基，同时将HA包裹在载体表面，降低了PAMAM的正电荷毒性，同时增加了药物的稳定性，包封在内部的药物释放较缓慢，可以长时间缓释药物，维持体内血药浓度稳定，减少给药次数。

技术领域

本发明属于纳米生物医学技术领域，具体而言，涉及一种负载替莫唑胺的靶向纳米粒及其制备方法，尤其涉及一种以树枝状聚合物作为载体的靶向纳米粒子及其制备方法。

背景技术

黑素瘤是由异常黑素细胞过度增生引发的皮肤肿瘤，恶性程度极高，预后较差，其病死率占皮肤肿瘤死亡病例的80％左右。近年来发病率不断增加，年增长率为3～5％，且具有年轻化的趋势(Siegel RL,Miller KD,Jemal A.Cancer statistics,2016.CA Cancer JClin.2016,66(1):7-30.)。临床上治疗黑素瘤常用的化疗药物有达卡巴嗪、替莫唑胺(TMZ)、铂类、紫杉醇、福莫司汀等，然而疗效并不令人满意。其中，占主导地位的达卡巴嗪有效率仅为7.5％～12.2％，患者中位生存期5～6月(Gogas H J,Kirkwood J M,Sondak VK.Chemotherapy for metastatic melanoma.Cancer.2007,109(3):455-464.)。替莫唑胺是一种新型的第2代口服烷化剂，因其可口服，生物利用度高，能透过血脑屏障，对脑转移有治疗和预防作用，被很多国家推荐用于黑素瘤一线治疗(Agarwala S S,Kirkwood JM.Temozolomide,a novel alkylating agent with activity in the central nervoussystem,may improve the treatment of advanced metastatic melanoma.Theoncologist.2000,5(2):144-151.)。TMZ通过DNA链甲基化，引起DNA单链或双链断裂，阻断DNA复制，最终导致肿瘤细胞死亡。然而，同其它化疗药物一样，TMZ的疗效有限，且由于缺少靶向性，TMZ在杀伤肿瘤细胞的同时对其他非肿瘤细胞也有杀伤作用，引起毒副作用。药代动力学显示口服TMZ后血浆药物浓度于1h内达峰，之后消除迅速，平均半衰期为1.8h。TMZ在生理环境下很容易降解，在肿瘤部位的酸性环境中反而较稳定(郑蓉,蒋德锡,廖心丹，等.温度及pH对替莫唑胺溶液稳定性的影响.华西药学杂志.2012,(05):550-551.)。此外，TMZ作用机制会启动细胞内修复机制，上调O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因表达，后者通过自身活性中心的半胱氨酸残基与O⁶-甲基鸟嘌呤上的烷基基团共价结合并将其移除，从而使损伤的DNA修复，导致肿瘤细胞对TMZ耐药(Bradbury PA,Middleton MR.DNArepair pathways in drug resistance in melanoma.Anti-Cancer Drugs.2004,15(5):421-426.)。因此，如何提高TMZ的稳定性和敏感性，增强其靶向性从而降低其副作用是目前研究的热点与难点，也是提高黑素瘤整体疗效的关键。