[发明专利]一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的提取及测定方法

权利要求书

1.一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

将捕集有主流烟气总粒相物的滤片加入浓度为5~100 mmol/L的乙酸铵溶液进行提取，过滤，得粗提取液；

将步骤1）所得粗提取液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样；

用甲醇水溶液进行淋洗；

用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97~99:3~1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97~99:3~1；所述氨水的质量分数为35％。

2.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，所述卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺包括NNN、NNK、NAT和NAB。

3.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，所述粗提取液在上样前调pH至3.0~11.0。

4.如权利要求3所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，调pH所用pH调节剂为乙酸或氨水。

5.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，步骤3）中所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为5%~20%。

6.一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提取液的制备

1）将含有同位素内标的捕集有主流烟气总粒相物的滤片加入浓度为5~100mmol/L乙酸铵溶液进行提取，得粗提取液；

2）将步骤1）所得粗提取液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样；

3）用甲醇水溶液进行淋洗，所述甲醇水溶液的体积分数为5%~20%；

4）用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97~99:3~1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97~99:3~1；

（2）卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的测定

将步骤4）所得提取液吹干，用甲酸铵溶液、甲酸乙腈溶液配制而成的复溶液进行复溶，之后进行液相色谱-串联质谱测定，所述液相色谱-串联质谱测定时的色谱条件为：色谱柱：Poroshell 120 EC-C18；柱温：40℃；进样量：5μL；流动相为0.01mol/L甲酸铵A-0.1%甲酸乙腈B；流速：0.4 mL/min；流动相梯度程序：t=0 min，10% B，t=2.0 min，40% B，t=4.0min，60%B，t=6.0min，90% B，t=9.0 min，90% B，t=9.5min，10% B，t=15.0min，10% B；质谱条件：电喷雾电压5000V；雾化气压力50 psi；辅助雾化气压力50psi；气帘气压力35 psi；离子源温度450℃；进口电压8V；出口电压10V；去簇电压40V；驻留时间40 ms；监测模式：多反应监测。

7.如权利要求6所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，步骤1）中同位素内标包括NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4、NAB-d4。

8.如权利要求6所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，步骤（2）中复溶液由0.01mol/L的甲酸铵溶液与甲酸体积分数为0.1%的甲酸乙腈溶液按照1~2:1~2的体积比配制而成。

9.如权利要求6所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，所述多反应监测中NNN、NNK、NAT和NAB的定量离子对依次为178.1>148.2、208.1>122.1、190.1>160.1和192.1>162.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN、NNK、NAT和NAB的定性离子对依次为178.1>120.1、208.1>106.1、190.1>106.1和192.1>133.1，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4的定量离子对依次为182.1>152.2、212.1>126.1、194.1>164.1和196.1>166.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV。