[发明专利]一种基于疏水离子交换固相萃取的戒烟制品中N‑亚硝胺的提取及测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于疏水离子交换固相萃取的戒烟制品中N-亚硝胺的提取及测定方法，属于烟草化学检验技术领域。

背景技术

烟草特有N-亚硝胺是胺类化合物在酸性条件下与亚硝化试剂反应而生成的，是一类受到广泛关注的致癌物质，不仅是霍夫曼清单和美国食品药品监督管理局“烟草制品及烟气中有害及潜在有害物质名单”中的重要物质，也是国际癌症研究机构“无烟气烟草制品中28种有害物质”名单中的重要成分。因此，准确分析烟草特有N-亚硝胺含量，对保障产品消费安全具有重要意义。

吸食戒烟制品可以获得普通烟的满足感，为了得到这种满足感，部分戒烟制品样品中添加了烟叶成分，进而也会有N-亚硝胺的存在。然而，目前还没有戒烟制品中N-亚硝胺测定的相关报道。

申请公开号为CN102012407A的发明专利公开了一种烟草及烟草制品中烟草特有N-亚硝胺的检测方法，在该方案中将萃取液流经固相萃取小柱，然后采用甲酸水淋洗，最后用氨水/甲醇洗脱，得到待测液。该方案中的固相萃取填料为N-乙烯基吡咯烷酮-苯磺酸共聚物，有机聚合物填料在有机溶剂中会溶胀，会在一定程度上影响填料的富集和净化效果。另外，该方案中也没有对影响萃取效果的各种参数进行优化。而且戒烟制品样品中通常会有中药成分的加入，因此其样品基质与烟草样品基质有很大差别，因此该方案中的技术方案可能不适用于戒烟制品样品。

因此，开发一种戒烟制品中N-亚硝胺的测定方法迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于疏水离子交换固相萃取的戒烟制品中N-亚硝胺的提取方法。

本发明的另一个目的是提供一种基于疏水离子交换固相萃取的戒烟制品中N-亚硝胺的测定方法。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

一种基于疏水离子交换固相萃取的戒烟制品中N-亚硝胺的提取方法，包括以下步骤：

1)将戒烟制品加入浓度为5～100mmol/L的乙酸铵溶液进行提取，得粗提取液；

2)将步骤1)所得的粗提取液流过经活化处理后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样；

3)用甲醇水溶液进行淋洗；

4)用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97～99:3～1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97～99:3～1；所述氨水的质量分数为35％。

上述戒烟制品为点燃型戒烟灵的填充物。

上述戒烟制品中N-亚硝胺包括NNN、NNK、NAT和NAB。

上述步骤1)中提取操作为：将戒烟制品加入浓度为5～100mmol/L的乙酸铵溶液中，进行超声处理，然后分离不溶物，得粗提取液。

上述乙酸铵溶液的浓度优选为10mmol/L～80mmol/L。

上述每1g戒烟制品所用乙酸铵溶液的用量为10～100mL。

上述超声处理，超声功率280～700W，频率20～40kHz，时间≥10min。超声时间优选为10～60min。超声时间进一步优选为30min。

上述分离不溶物采用过滤或离心的方式。

上述过滤采用水相滤膜。

上述水相滤膜的孔径为0.20～0.50μm。优选为0.22μm或0.45μm。

上述水相滤膜为聚醚砜膜。

上述离心，是将超声处理后的混合液静置，然后进行离心，最后取上层清液。

上述静置时间为3～10min。优选为5min。

上述离心转速5000～10000rpm，时间为3～10min。离心时间优选为5min。

上述HiCapt MCX固相萃取柱为疏水/离子交换混合保留机理固相萃取柱。

上述HiCapt MCX固相萃取柱购自于维泰克科技(武汉)有限公司。

上述HiCapt MCX固相萃取柱具有疏水和强离子交换作用。

上述所用HiCapt MCX固相萃取柱中的填料的用量为：每将6mL粗提取液完成上样时，相应使用50～1000mg的HiCapt MCX固相萃取填料。优选地，6mL粗提取液对应使用500mg HiCapt MCX固相萃取填料。

上述粗提取液在上样前调pH至3.0～11。优选为调pH至4～6。

上述调节pH值的调节剂为乙酸溶或氨水。当选用乙酸调节pH时，优选质量分数为10％的乙酸溶液。