[发明专利]一种二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及心脏瓣膜畸形筛查技术领域，尤其涉及一种二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒。

背景技术

二叶式主动脉瓣畸形(BAV)早期检测是困难的，而确定性诊断通常需要心脏超声观察心腔和心脏瓣膜。虽然心脏超声检查有非侵袭性和无辐射的优点，但超声检查是针对个人进行的检查，并且也不能自动化。不仅如此，对心脏超声结果正确的判断很大程度依赖医师的技术水平。因此目前的超声检查对人群筛查二叶式主动脉瓣畸形存在较大的不足。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种客观、便捷的二叶式主动脉瓣畸形筛查方法及其试剂盒，从而克服现有的超声技术对二叶式主动脉瓣畸形诊断的上述缺点。

为实现上述目的，本发明提供了一种二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒，所述试剂盒包括：流动相A、流动相B、校正品、标准品；其中流动相A为0.1％(v/v)甲酸水溶液，流动相B为0.1％(v/v)甲酸的乙腈溶液，校正品为亮氨酸脑啡肽，标准品为甘油一酸酯(monoglyceride，MG)和甘油磷酰乙醇胺的混合物(glycerophospho-N-oleoyl ethanolamine，GNOE)。

优选地，所述标准品中甘油一酸酯和甘油磷酰乙醇胺的体积比为18:2。

优选地，流动相B的流量为0.3-0.5ml/min，最佳为0.4ml/min。

优选地，所述二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒还包括甲醇。

进一步，所述二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒还包括盒体和试剂固定件。

进一步，所述二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒是用于液相色谱或液质联用检测系统的。

优选地，本发明检测的样本为血清样本。

优选地，本发明的试剂盒还包括ZS值计算公式：

ZS＝0.007×C_GNOE+0.006×C_MG-5.867；

式中，C_GNOE代表待测样本中GNOE的含量，C_MG(18:2)代表待测样本中MG(18:2)的含量；在一些情况下，含量可以用化合物峰的峰面积来表示，在另一些情况下，含量可以用经过换算获得的样本中化合物浓度来表示；以及在其它情况下，可以采用任何能体现化合物含量的数值来表示。

无论用何种数值表示化合物含量，都需要为ZS设定一个阈值，若待测样本ZS值大于阀值，检测结果为阳性，否则为阴性。在不同的实验条件下，或针对不同的人群可以设定不同的ZS阈值。

本发明通过对血清样本的检测，在液相色谱—质谱联用技术的原理下，采集血清各个物质的信号，对数据分析，通过制定受试者工作特征曲线(ROC曲线)，得出联合检测MG与GONE的峰值，根据峰值计算ZS值，检测，曲线下面积(AUC)最大。本发明采取的ZS检测模式对二叶式主动脉瓣畸形的特异度和敏感度均为最高。

附图说明

图1是本发明试剂盒的一个较佳实施例的立体结构示意图；

图2是图1中试剂盒的俯视图；

图3是QC样品阳离子和阴离子模式下的总离子色谱图；

图4是BAV患者和健康对照受试者在阳离子模式和阴离子模式下的PCA分数，PCA＝主成分分析；

图5是PLS-DA在阴离子模式和阳离子模式下的验证，PLS-DA＝偏最小二乘判别分析；

图6是评估组和验证组MG(18:2)、GNOE、PE(18:2)和ZS在主动脉瓣畸形患者预测的ROC曲线，AUC＝曲线下面积，ZS＝zhongshan，ROC＝受试者工作特征曲线。

具体实施方式

实施例1

如图1和图2所示为本发明一种二叶式主动脉瓣畸形筛查试剂盒的结构示意图，该试剂盒由盒体1、试剂固定件2、流动相A 3、流动相B 4、校正品5、甲醇6和标准品7组成。

流动相A 3为0.1％(v/v)甲酸水溶液，规格为6mL/瓶×1。

流动相B 4为0.1％(v/v)甲酸的乙腈溶液，规格为6mL/瓶×1。

校正品5为标准亮氨酸脑啡肽样品，规格为1mL/瓶×1。

甲醇6为德国默克公司生产的高效液相色谱法级别的甲醇，规格为12mL/瓶×1。

标准品7为甘油一酸酯和甘油磷酰乙醇胺18:2(v/v)的混合物，规格为1mL/瓶×1。

实施例2