[发明专利]催化UDP-鼠李糖生物合成的基因CsRHMb及其编码蛋白和应用

权利要求书

1.催化UDP-鼠李糖生物合成的基因CsRHMb，其特征在于，基因CsRHMb为：SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

2.由权利要求1所述基因CsRHMb编码的蛋白。

3.根据权利要求2所述的蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.含有权利要求1所述基因CsRHMb的表达盒。

5.含有权利要求1所述基因CsRHMb或权利要求4所述表达盒的载体。

6.含有权利要求1所述基因CsRHMb、权利要求4所述表达盒或权利要求5所述载体的工程菌。

7.根据权利要求6所述的工程菌，其特征在于，其是将所述基因CsRHMb插入pMAL-c2X载体的多克隆位点中构建得到重组载体pMAL-c2X-CsRHMb，然后将重组载体转化至大肠杆菌Novablue（DE3）中得到的。

8.权利要求2或3所述蛋白，或者权利要求6或7所述工程菌在催化UDP-葡萄糖合成UDP-鼠李糖中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，其是向含有UDP-葡萄糖、NAD和NADPH的反应体系中，加入权利要求2或3所述蛋白，或者从权利要求6或7所述工程菌中分离纯化的重组蛋白rCsRHMb，通过酶催化反应，生物合成UDP-鼠李糖。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，总反应体系为50 μL：含有3 mM UDP-葡萄糖、3 mM NAD和3 mM NADPH，反应缓冲液为100 mM pH8.0-10.0的NaH₂PO₄/Na₂HPO₄混合液，以及10-20 μg权利要求2或3所述蛋白，或者所述重组蛋白rCsRHMb；

最适酶反应条件为：pH控制在8.0-10.0的NaH₂PO₄/Na₂HPO₄缓冲液，反应温度25-45℃。