[发明专利]一种快速鉴定和筛选高粱萌发期耐盐性材料的方法

说明书

本发明提供了一种快速鉴定和筛选高粱萌发期耐盐性材料的方法，包括种子处理、根的培养、氯化钠胁迫处理、耐盐性判断等步骤。观察根的弯曲程度，与处理前相比，根向上弯曲长度超过0.2厘米，即为在盐胁迫下发生弯曲的根，耐盐性强；此时如果根是直立的，与盐处理前没有变化，说明在盐胁迫下，该品种的根没有生长，为盐敏感的高粱材料。本发明鉴定速度快，效果准确、直观，对鉴定环境条件要求低，可控性强，该方法也可用于快速筛选某个或某些高粱品种耐盐极限浓度；还可筛选大批高粱种质资源或育种材料的中的耐盐和盐敏感材料。

技术领域

本发明涉及种质资源筛选与鉴定领域，尤其涉及一种高粱萌发期耐盐性筛选和鉴定方法。

背景技术

高粱是全球第五大重要作物，具有粮、饲、酿造等多种用途。由于高粱基因组较小，且已经完成基因组测序，成为继水稻之后又一个重要的粮食和能源模式作物。

我国有15多亿亩盐碱地，大部分处于荒芜状态。高粱属于中度耐盐作物，在中轻度盐碱地上种植高粱有利于充分利用我国土地资源，缓解国家能源和饲料短缺问题。但是由于高粱品种间的耐盐性存在较大差异，并非所有品种种植在盐碱地上都能获得较高的产量；另外高粱耐盐育种中，耐盐种质少，遗传基础狭窄，制约了耐盐甜高粱选育的效率，因此，筛选耐盐性强的高粱种质资源和品种，不论是对耐盐基础理论研究，还是对耐盐种质创制和品种选育都具有重要的意义。

目前对高粱萌发期耐盐性鉴定，一般采用《高粱种质资源描述规范和数据标准》中的芽期耐盐性鉴定方法，利用相对盐害率进行鉴定。该方法通过对高粱种子进行一周盐处理，调查盐处理和对照的发芽率，以相对盐害率反映幼芽受盐害的程度，根据相对盐害率划分耐盐性级别，可定量评价每个品种的耐盐性，对耐盐性进行分级。但是对于筛选大量的突变体、种质资源和后代育种材料，该方法存在以下缺点：鉴定时间较长，需要7天；鉴定结果需要统计对比，结果不直观；由于在培养皿中萌发，种子胚根生长杂乱，不能有效鉴定根部的生长状况。本发明人在实验中发现，盐害可导致种子萌发延迟，叶片边缘灼伤、萎蔫、变黄，最终导致叶片脱落，同时还抑制了根的发育。因此，盐胁迫中根的生长在一定程度上反映了种子的耐盐性。尽管目前有较多的高粱萌发期耐盐性鉴定与筛选的方法，但利用高粱种子根部弯曲与否来来筛选高粱耐盐性材料的方法还未见有相关研究。

发明内容

为解决现有技术上的不足，本发明提供了一种快速鉴定和筛选高粱萌发期耐盐性材料的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种快速鉴定和筛选高粱萌发期耐盐性材料的方法，包括以下步骤：

(1)种子处理

选取饱满、完整高粱种子，用种子包衣剂进行包衣，放在铺有一层滤纸的培养皿中，加入自来水，使水面与种子面平齐，盖上培养皿盖子，放入28摄氏度光照培养箱中，黑暗培养24小时左右，等种子露白后备用；

（2）根的培养

根据样品种子量的多少准备不同规格的蜡质、发芽纸和广口瓶；

蜡纸1的背面写实验材料编号，发芽纸2和发芽纸3用水浸湿；蜡纸1带有编号的一面朝下放于底层，把发芽纸2放在蜡纸1上，用镊子把露白基本一致的种子胚根朝下排放在发芽纸2上，使其呈一条直线，把发芽纸3盖在种子上面，把蜡纸1，发芽纸2和发芽纸3轻轻压平后，从一边轻轻卷起成一纸卷，两头和中间用橡皮筋固定，防发芽纸中的种子移动位置。胚根方向朝下，放入装有自来水广口瓶中，广口瓶中水溶液的高度距离瓶底2-3厘米；放于28度光照培养箱中，培养箱条件：白天12小时，黑暗12小时，28摄氏度，光照度10000LX。培养24-48小时挑选根长1-2厘米左右的种子，进行盐胁迫处理；

（3）氯化钠胁迫处理