[发明专利]用于检测血清中α-L-岩藻糖苷酶的抗体及试剂盒

说明书

本发明涉及血清抗原检测技术，具体涉及一种用于检测血清中α‑L‑岩藻糖苷酶的抗体及试剂盒。提供用于检测待测血清中肝癌标志物α‑L‑岩藻糖苷酶的抗体对，其特征在于，由第一抗体和第二抗体组成；所述第一抗体作为包被抗体，由保藏编号为CGMCC NO：13583的杂交瘤细胞分泌；所述第二抗体作为检测抗体，由保藏编号为CGMCC NO：13584的杂交瘤细胞分泌。所述抗体对特异性强，可以同时与其他标志物抗体联合使用，不受干扰地检测出血清中AFU；灵敏度高，可检测到浓度低至250pg/ml的AFU，能够准确定量血清中的AFU蛋白。

技术领域

本发明涉及血清抗原检测技术，具体涉及一种用于检测血清中α-L-岩藻糖苷酶的抗体及试剂盒。

背景技术

癌症在全球的发病率呈上升趋势。2014年2月3日，世界卫生组织发表的《全球癌症报告2014》显示，中国新增癌症病例高居世界第一位，其中肝癌的新增病例和死亡人数均居世界首位。肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一，我国是乙肝大国，肝癌发病率占全球总数的55％。临床上肝癌的诊断主要是通过血清检测甲胎蛋白 (Alpha-fetoprotein,AFP)，B超发现肝脏结节，然后CT和MRI检查。然而AFP阳性率约60～70％，并非所有肝细胞癌都分泌大量的AFP，约40％早期原发性肝癌及15％～20％晚期原发性肝癌患者的血清AFP水平是正常的，故仅靠AFP诊断肝癌尚有漏诊的可能，导致临床80％患者确诊时已属中晚期。中晚期肝癌基本无有效治疗方法，对乙肝、肝硬化等高危人群进行肝癌肿瘤标志物的筛查和早期诊断是解决肝癌高死亡率的最有效措施。

α-L-岩藻糖苷酶(AFU)是一种溶酶体水解酶，广泛存在于各种组织细胞和体液中，参与糖蛋白及糖脂等多种生物活性物质的分解代谢。肝脏是富含溶酶体的器官之一，当肝细胞癌变时，AFU合成增多，且肿瘤细胞膜通透性增大，释放到血液中的酶量增多，且降解速度减慢，因而引起血清AFU浓度升高。血清AFU活性动态曲线对判断肝癌治疗效果、估计预后和预报复发有着极其重要的意义，甚至优于AFP。但血清AFU活力测定在某些转移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢或子宫癌之间有一些重叠，甚至在某些非肿瘤性疾患如肝硬化、慢性肝炎和消化道出血等也有轻度升高，在使用AFU时应与AFP同时测定，可提高原发性肝癌的诊断阳性率达93.1％，有较好的互补作用。

Luminex悬浮芯片技术是美国Luminex公司在20世纪90年代中期开发的一种多功能的液相芯片分析平台，也称为液体芯片。它有机地整合了有色微球、激光技术、最新的高速数字信号处理和计算机技术，应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球可以自由组合，可以在一个25-50微升的样品内同时检测最多达100种不同的检测项目，具有重复性与稳定性好、高通量、检测指标可灵活选择，以及高灵敏度和高信噪比等诸多优点，适用于血浆中抗原类蛋白的分析以及重大疾病抗原标志物的定量分析，是一项具有重大意义的医学辅助检测手段。与传统的固相芯片相比，克服了固相芯片在大分子检测时受表面张力、空间效应等对反应动力学的干扰，使检测结果的稳定性和重复性得到很大的提高。

因此，获得AFU特异性抗体，利用Luminex悬浮芯片技术对血清中AFU含量进行检测，将有助于提高早期肝癌的检出率。

发明内容

为了提高早期肝癌的检出率，本发明提供用于检测血清中α-L-岩藻糖苷酶的抗体及试剂盒，其特异性强、灵敏度高，能够准确检测出血清中α-L-岩藻糖苷酶的含量。

请求保护的技术方案如下：

用于制备抗α-L-岩藻糖苷酶的抗体的抗原蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO.1所示。

编码所述抗原蛋白的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

用于检测待测血清中肝癌标志物α-L-岩藻糖苷酶的单克隆抗体，其特征在于，由保藏编号为CGMCC NO.13584的杂交瘤细胞分泌。