[发明专利]用于检测血清中高尔基糖蛋白73的抗体及试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及血清抗原检测技术，具体涉及一种用于检测血清中高尔基糖蛋白73的抗体及试剂盒。

背景技术

癌症在全球的发病率呈上升趋势。2014年2月3日，世界卫生组织发表的《全球癌症报告2014》显示，中国新增癌症病例高居世界第一位，其中肝癌的新增病例和死亡人数均居世界首位。肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一，我国是乙肝大国，肝癌发病率占全球总数的55％。临床上肝癌的诊断主要是通过血清检测甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)，B超发现肝脏结节，然后CT和MRI检查。然而AFP阳性率约60～70％，并非所有肝细胞癌都分泌大量的AFP，约40％早期原发性肝癌及15％～20％晚期原发性肝癌患者的血清AFP水平是正常的，故仅靠AFP诊断肝癌尚有漏诊的可能，导致临床80％患者确诊时已属中晚期。中晚期肝癌基本无有效治疗方法，对乙肝、肝硬化等高危人群进行肝癌肿瘤标志物的筛查和早期诊断是解决肝癌高死亡率的最有效措施。

在早期肝癌诊断中，利用复合型指标对肝癌进行动态观察，能够提高肝癌诊断符合率，及时制定和实施治疗方案，延长患者的生命。高尔基糖蛋白73(Golgi Protein 73，GP73)是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白，2000年Kladney研究表明，在正常的人体肝组织中，GP73主要由胆管上皮细胞表达，而肝细胞表达很少甚至不表达，但是在有乙型肝炎病毒(HBV)及腺病毒感染的肝组织中，胆管细胞表达GP73改变不明显，而肝细胞则呈高表达。2005年Block等发现，在肝癌患者血清中GP73水平显著升高。在一项研究中，与肝硬化患者相比，肝癌患者的血清GP73水平显著升高。在少数报道中，GP73诊断肝癌的敏感性可达69％，特异性可达90％，对于早期肝癌的诊断，GP73的敏感性优于AFP。因此，GP73被认为是最具潜力的HCC血清标志物之一。

Luminex悬浮芯片技术是美国Luminex公司在20世纪90年代中期开发的一种多功能的液相芯片分析平台，也称为液体芯片。它有机地整合了有色微球、激光技术、最新的高速数字信号处理和计算机技术，应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球可以自由组合，可以在一个25-50微升的样品内同时检测最多达100种不同的检测项目，具有重复性与稳定性好、高通量、检测指标可灵活选择，以及高灵敏度和高信噪比等诸多优点，适用于血浆中抗原类蛋白的分析以及重大疾病抗原标志物的定量分析，是一项具有重大意义的医学辅助检测手段。与传统的固相芯片相比，克服了固相芯片在大分子检测时受表面张力、空间效应等对反应动力学的干扰，使检测结果的稳定性和重复性得到很大的提高。

因此，获得特异性强的GP73检测抗体，利用Luminex悬浮芯片技术对血清中GP73含量进行检测，将有助于提高早期肝癌的检出率。

发明内容

为了提高早期肝癌的检出率，本发明提供用于检测血清中高尔基糖蛋白73的抗体及试剂盒，其特异性强、灵敏度高，能够准确检测出血清中高尔基糖蛋白73的含量。

请求保护的技术方案如下：

用于检测待测血清中肝癌标志物高尔基糖蛋白73的单克隆抗体，其特征在于，由保藏编号为10B9F11的杂交瘤细胞分泌。

分泌上述单克隆抗体的杂交瘤细胞，其特征在于，保藏编号为10B9F11。

用于检测待测血清中肝癌标志物高尔基糖蛋白73的抗体对，其特征在于，由第一抗体和第二抗体组成；所述第一抗体作为包被抗体，由保藏编号为8F10D1的杂交瘤细胞分泌；所述第二抗体作为检测抗体，由保藏编号为10B9F11的杂交瘤细胞分泌。

用于肝癌早期诊断的试剂盒，其特征在于，包括上述单克隆抗体或抗体对，以及用于免疫检测的通用试剂。

所述试剂盒，包括上述抗体对，所述第一抗体与磁珠偶联，所述第二抗体用生物素标记，所述用于免疫检测的通用试剂为链霉亲和素-藻红蛋白。

所述试剂盒，还包括高尔基糖蛋白73的标准品和/或以所述高尔基糖蛋白73的标准品制作的标准曲线或直线回归方程说明书。

所述试剂盒，还包括洗涤缓冲液和测定缓冲液。

任一所述的试剂盒，还包括抗甲胎蛋白AFP的抗体、抗α-L-岩藻糖苷酶AFU的抗体、抗血管内皮生长因子VEGF的抗体和/或抗细胞外基质金属蛋白酶诱导因子CD147的抗体，及其相应的免疫检测试剂。