[发明专利]分泌TRAIL的间充质干细胞及其治疗脑瘤的用途

权利要求书

1.一种分离的构建体，其中，所述构建体包含(1)分泌信号肽编码区；(2)TRAIL蛋白三聚体稳定结构编码区；和(3)TRAIL蛋白片段编码区，

其中所述TRAIL蛋白片段具有与下列(a)或(b)的氨基酸序列相同或基本上相同的氨基酸序列：

(a)TRAIL的114～281氨基酸残基；

(b)与(a)的氨基酸序列具有至少90％同一性，更优选地至少95％同一性，例如至少99％同一性，并且具有TRAIL蛋白活性。

2.权利要求1的构建体，其中所述分泌信号肽是人原纤维蛋白分泌信号肽，人生长激素分泌信号肽，人免疫球蛋白信号肽，人白细胞介素2信号肽，优选为人原纤维蛋白分泌信号肽，例如所述分泌信号肽编码区具有SEQ ID NO：2所示的序列。

3.权利要求1或2的构建体，其中所述TRAIL蛋白三聚体稳定结构序列是异亮氨酸拉链结构，亮氨酸拉链结构，例如所述TRAIL蛋白三聚体稳定结构编码区具有SEQ ID NO：3所示的序列。

4.权利要求1-3中任一项的构建体，其中所述TRAIL蛋白片段编码区具有SEQ ID NO：1所示的序列。

5.权利要求1-4中任一项的构建体，其具有SEQ ID NO：4所示的序列。

6.一种载体，其包含权利要求1-5中任一项的构建体，优选的，所述载体为动物细胞表达载体，优选为慢病毒载体，例如pCDH。

7.一种哺乳动物细胞，其基因组上整合了权利要求1-5中任一项的构建体，并且可表达和分泌所述TRAIL蛋白或其片段，所述哺乳动物细胞优选为人、小鼠、大鼠、猪或猴的干细胞。

8.权利要求7的哺乳动物细胞，其为间充质干细胞，例如脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。

9.权利要求7或8的哺乳动物细胞，其是通过下述方法制备的：

a.构建如权利要求1-5中任一项的构建体，所述构建体包含(1)分泌信号肽编码区；(2)TRAIL蛋白三聚体稳定结构编码区；和(3)TRAIL蛋白片段编码区，

其中所述TRAIL蛋白片段具有与下列(a)或(b)的氨基酸序列相同或基本上相同的氨基酸序列：

(a)TRAIL的114～281氨基酸残基；

(b)与(a)的氨基酸序列具有至少90％同一性，更优选地至少95％同一性，例如至少99％同一性，并且具有TRAIL蛋白活性；

b.制备包含上述构建体的载体，优选的，所述载体为动物细胞表达载体，优选为慢病毒载体，例如pCDH；

c.用所述载体感染哺乳动物细胞，所述哺乳动物细胞优选为干细胞，例如间充质干细胞。

10.一种用于治疗脑瘤，例如神经胶质瘤，的药物组合物，其含有权利要求1-5中任一项的构建体或权利要求6的载体或权利要求7的细胞。

11.权利要求1-5中任一项的构建体或权利要求6的载体或权利要求7-9中任一项的细胞或权利要求10的药物组合物在治疗脑瘤，例如神经胶质瘤，中的应用。

12.权利要求1-5中任一项的构建体或权利要求6的载体或权利要求7-9中任一项的细胞或权利要求10的药物组合物在制备治疗脑瘤，例如神经胶质瘤，的药物中的应用。