[发明专利]一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法

说明书

技术领域

本发明属于水族养殖领域，特别涉及一种水族箱中水体钙离子的测试方法。

背景技术

水族在水族箱饲养过程中会产生一定的钙离子，钙离子会对水族生产产生较大的影响，需要随时测试和去除钙离子，而测试钙离子含量是一个非常重要的步骤，就目前来说，钙离子测试基本采用EDTA滴定法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法等，这些方法都可以满足一定的测试需求，但也都存在较大的缺陷，EDTA滴定法测试准确性差、灵敏度差、精准度低，而原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法都需要用到非常精密的设备，设备成本高，对于大多数企业和使用者来说的无法实现的，不便于推广使用。

本发明要解决的技术问题是提供一种测试准确性好、灵敏度高、精准度好、设备简单成本低、易于实现及广泛推广使用的钙离子测试方法。

发明内容

为解决上述现有技术测试准确性差、灵敏度低、精准度差、设备成本高、不易实现无法推广使用等问题，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，测试方法包括以下步骤，1）备料 Zn溶液：0.1-3x10^-2M，EGTA溶液：0.1-3x10^-2M，Zn-EGTA溶液 用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度，PAN乙醇溶液 0.1-3x10^-3 M，缓冲溶液：1-2M 硼酸溶液，pH5-10，采用NaOH调节pH，Ca标准溶液：10-100ug/mL；2）混料至比色管 移取一定量钙标准溶液于25mL比色管中，准确加入2-10mLZn-EGTA溶液，1-3mL PAN溶液，1-4mL缓冲溶液；3）吸光度测量 用水定容到25mL，摇匀，室温放置10-30min显色，放入比色皿中，与波长500-600nm的空白试剂为参比测量吸光度；4）标准曲线建立 根据标准钙溶液建立标准曲线；5）钙含量测算 将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或者全自动生化分析仪器下，检测主波长500-600nm处吸光度，测算出离子钙含量的大小。

本发明的有益效果在于：采用Zn-EGTA竞争法测定离子钙，测试精准度高，灵敏度好，设备简单成本低，普通光谱仪即可，操作非常简单简便，易于实现和广泛推广使用。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明技术方案作进一步的详细描述，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定：

一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，测试方法包括以下步骤，1）备料 Zn溶液：0.1-3x10^-2M，EGTA溶液：0.1-3x10^-2M，Zn-EGTA溶液 用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度，PAN乙醇溶液 0.1-3x10^-3 M，缓冲溶液：1-2M 硼酸溶液，pH5-10，采用NaOH调节pH，Ca标准溶液：10-100ug/mL；2）混料至比色管 移取一定量钙标准溶液于25mL比色管中，准确加入2-10mLZn-EGTA溶液，1-3mL PAN溶液，1-4mL缓冲溶液；3）吸光度测量 用水定容到25mL，摇匀，室温放置10-30min显色，放入比色皿中，与波长500-600nm的空白试剂为参比测量吸光度；4）标准曲线建立 根据标准钙溶液建立标准曲线；5）钙含量测算 将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或者全自动生化分析仪器下，检测主波长500-600nm处吸光度，测算出离子钙含量的大小。

选用与钙、镁生成的络合物稳定性差别较大的EGTA（乙二醇二乙醚二胺四乙酸）与锌配制成络合竞争剂,使钙与锌络合竞争,其反应式为：

Ca²⁺+Zn²⁺-EGTA=Ca²⁺-EGTA+Zn²⁺，

然后以PAN（1-2-吡啶偶氮-2-萘酚）为显色剂,以吸光度法进行测定，通过实验选定体系显色酸度为pH4-7,波长500-580nm，钙量在1-8ug/mL范围符合比尔定律。

其中需要用到的几种主要试剂如下：

Zn溶液：0.1-3x10^-2M

EGTA溶液：0.1-3x10^-2M

Zn-EGTA溶液 用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度；

PAN乙醇溶液 0.1-3x10^-3M；