[发明专利]金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒在审
申请号: | 201710148455.1 | 申请日: | 2017-03-14 |
公开(公告)号: | CN106645076A | 公开(公告)日: | 2017-05-10 |
发明(设计)人: | 陈伟;施小琼;吴钢伟;邓豪华;黄开源 | 申请(专利权)人: | 福建医科大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 福州智理专利代理有限公司35208 | 代理人: | 王义星 |
地址: | 350004 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纳米 探针 蛋白 荧光 检测 试剂盒 | ||
1.一种金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒,其特征是试剂盒中有金纳米簇探针溶液和牛血清白蛋白溶液,所述的金纳米簇探针为6-氮杂-2-硫代胸腺嘧啶-金纳米簇,金纳米簇探针溶液作为a液,牛血清白蛋白溶液为标准贮备液。
2.根据权利要求1所述的金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒,其特征是所使用的金纳米簇探针由下述方法制备的:取含0.2 mol/L氢氧化钠,浓度为80 mmol/L的6-氮杂-2-硫代胸腺嘧啶溶液与浓度为10 mg/mL的氯金酸溶液按1:1比例混合均匀,室温下磁力搅拌1小时,用截留分子量为3500的透析袋对反应液进行纯化,冷冻干燥后得到6-氮杂-2-硫代胸腺嘧啶-金纳米簇粉末。
3.根据权利要求1或2所述的金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒,其特征是利用金纳米簇探针在535 nm处的荧光强度值以判断总蛋白含量,所使用的激发波长为472 nm。
4.根据权利要求1或2或3所述的金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒,其特征是测定的线性范围为10~400 μg/mL,检测限为0.88 μg/ml。
5.一种金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒测定人血清总蛋白的方法,其特征是将牛血清白蛋白溶液作为标准贮备液用双蒸水稀释为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mg/mL的系列标准溶液,在20 μL系列标准溶液中分别加入180 μL用双蒸水配制的盐酸调节pH为5的浓度为0.5 mg/mL的金纳米簇探针溶液,充分混匀后置于30 °C水浴反应30分钟,以472 nm为激发波长,测定在535 nm处的荧光强度值,绘制总蛋白标准曲线或计算回归方程,取人血清样品,用双蒸水稀释50倍,在20 μL人血清稀释液中加入180 μL 用双蒸水配制的盐酸调节pH为5的浓度为0.5 mg/mL的金纳米簇探针溶液,充分混匀后置于30 °C水浴反应30分钟,以472 nm为激发波长,测定在535 nm处的荧光强度值,根据标准曲线或回归方程进行定量,获得血清样品中的总蛋白含量。
6.一种金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒测定人血浆总蛋白的方法,其特征是将牛血清白蛋白溶液作为标准贮备液用双蒸水稀释为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mg/mL的系列标准溶液,在20 μL系列标准溶液中分别加入180 μL用双蒸水配制的盐酸调节pH为5的浓度为0.5 mg/mL的金纳米簇探针溶液,充分混匀后置于30 °C水浴反应30分钟,以472 nm为激发波长,测定在535 nm处的荧光强度值,绘制总蛋白标准曲线或计算回归方程,取人血浆样品,用双蒸水稀释50倍,在20 μL人血浆稀释液中加入180 μL 用双蒸水配制的盐酸调节pH为5的浓度为0.5 mg/mL的金纳米簇探针溶液,充分混匀后置于30 °C水浴反应30分钟,以472 nm为激发波长,测定在535 nm处的荧光强度值,根据标准曲线或回归方程进行定量,获得血浆样品中的总蛋白含量。
7.一种金纳米簇为探针的总蛋白荧光检测试剂盒测定牛奶总蛋白的方法,其特征是将牛血清白蛋白溶液作为标准贮备液用双蒸水稀释为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mg/mL的系列标准溶液,在20 μL系列标准溶液中分别加入180 μL用双蒸水配制的盐酸调节pH为5的浓度为0.5 mg/mL的金纳米簇探针溶液,充分混匀后置于30 °C水浴反应30分钟,以472 nm为激发波长,测定在535 nm处的荧光强度值,绘制总蛋白标准曲线或计算回归方程,取牛奶样品,用双蒸水稀释10倍,在10 μL牛奶稀释液中加入10 μL浓度为10 mol/L的EDTA溶液和180 μL用双蒸水配制的盐酸调节pH为5的浓度为0.5 mg/mL的金纳米簇探针溶液,充分混匀后置于30 °C水浴反应30分钟,以472 nm为激发波长,测定在535 nm处的荧光强度值,根据标准曲线或回归方程进行定量,获得牛奶样品中的总蛋白含量。
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