[发明专利]一种兔的视网膜色素变性模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术和医药领域，特别是涉及一种兔的视网膜色素变性模型的制备方法。

背景技术

视网膜色素变性是当前主要致盲性疾病之一。视网膜色素变性是一种进行性退行视网膜变性类疾病，它主要累及光感受器和色素上皮功能，是一种遗传性眼病。目前视网膜色素变性仍无明确有效的治疗药物和治疗方法，开发稳定可重复的理想的动物模型是解决相关研究和药物临床前药物评价的关键。

兔眼球大，背景数据清晰、丰富，是适合眼科研究及临床前药物评价。碘酸钠进入眼循环后可破坏视网膜色素上皮。目前已有利用兔通过静脉注射碘酸钠诱导建立视网膜色素变性疾病模型，静脉注射碘酸钠方法虽然操作更简单，但由于碘酸钠随静脉血液回流，再通过心脏进入机体各组织，进入眼组织的碘酸钠只是很少一部分，为到达视网膜色素变性的要求，必须给予较高剂量的碘酸钠，在该条件下可见明显的全身毒性，特别是肝脏、肾脏以及消化道，极易引起动物某种或多种脏器障碍或衰竭，最终导致动物死亡。静脉注射碘酸钠的方法，其引起视网膜色素变性的剂量与动物致死剂量相近，加上动物个体间体质差异，导致成模率低，重复性差，动物易死亡。1996年陈勤等，在“表皮生长因子治疗碘酸钠诱导视网膜色素上皮层扫描电镜观察”（眼科研究，第4期）文章中报道了通过耳缘静脉给新西兰兔注入10 mg/ml碘酸钠（剂量30 mg/kg）诱导视网膜色素变性，但该方法剂量偏低，故需要重复注射，而且重复注射间隔时间对结果影响较大。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种兔的视网膜色素变性模型的制备方法，能用于视网膜色素变性的研究和治疗药物开发及临床前评价。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种兔的视网膜色素变性模型的制备方法，包括步骤为：将碘酸钠溶液以颈内动脉注入的方式实施于兔，所述碘酸钠溶液到达兔的眼内。

在本发明一个较佳实施例中，所述碘酸钠溶液是浓度为10 mg/ml的剂量为15 mg/kg的碘酸钠溶液；所述碘酸钠溶液由生理盐水配制。

在本发明一个较佳实施例中，所述兔的视网膜色素变性模型的制备方法的具体步骤为：将兔的颈动脉暴露，阻断兔的颈总动脉和颈外动脉，将所述碘酸钠溶液注入颈内动脉，注射结束后解除兔的颈外动脉阻断，再解除兔的颈总动脉阻断。

在本发明一个较佳实施例中，所述碘酸钠溶液经颈总动脉注入兔的颈内动脉，推注时间为25-35秒。

在本发明一个较佳实施例中，解除兔的颈外动脉阻断后，45~90秒后再解除兔的颈总动脉阻断。

在本发明一个较佳实施例中，注射结束后用止血海绵压迫注射点5~10分钟止血。

本发明的有益效果是：本发明使用的碘酸钠剂量小，对动物全身毒性小，不影响动物生命安全，操作简单可行，可重复性好，个体间模型差异小，成功率高。能为视网膜色素变性的研究提供一种可靠的模型，同时为治疗视网膜色素变性药物研发和临床前评价提供了动物模型。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图，其中：

图1 是本发明兔的术前、术后3天、10天、3周、5周光相干断层扫描（OCT）图；

图2 是本发明兔的术前、术后3天、10天、3周、5周视网膜电流图（ERG）暗适应0.01结果图；

图3 是本发明兔的术前、术后3天、10天、3周、5周视网膜电流图（ERG）暗适应3.0结果图；

图4 是本发明兔的术前、术后3天、10天、3周、5周视网膜电流图（ERG）暗适应10.0结果图；

图5 是本发明兔的术前、术后3天、10天、3周、5周眼底照相图；

图6 是本发明兔的术前、术后3天、10天、3周、5周眼底荧光造影图；

图7 是本发明兔的视网膜组织病理学HE染色图（200×）；

图8是本发明兔的肾脏组织病理学HE染色图（100×）。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

提供一种兔的视网膜色素变性模型的制备方法，具体见下：