[发明专利]一种用于质谱分析的96孔高通量固相萃取装置及其应用

说明书

本发明提供一种用于质谱分析的96孔高通量固相萃取装置，主要由硅胶密封盖板、联排萃取柱孔、96孔联排萃取柱板、上下筛板、固相萃取柱填料、96孔样本收集板、样本收集孔组成。本发明采用填装了相应填料的96孔固相萃取板，连接真空负压装置或重力离心，用于高通量的从体液或生物样本裂解液中提取蛋白质或多肽，直接用于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱和电喷雾质谱分析，利用本发明装置，从大量的体液或裂解液生物样本中提取蛋白质或多肽等溶液可直接用于质谱检测，不需要额外干燥、富集、溶解等步骤。整个过程操作简便、快速、高通量，在质谱的高通量生物样本前处理中有着极好的应用价值。

技术领域

本发明属于质谱分析装置，涉及一种用于质谱分析的96孔高通量固相萃取装置，该装置可以用于生物样品的蛋白质提取并直接用于质谱检测。

背景技术

临床蛋白质组学质谱检测已经在疾病中得到了广泛的应用研究。由于蛋白质而并非核酸才是生命活动的具体执行者和体现者，因此研究疾病发病机制，寻找特异、灵敏的疾病标志物，客观上要求在蛋白质组的水平进行进一步探索。按技术和研究的目的分，肿瘤蛋白质组学可以分为表达蛋白质组学和功能蛋白质组学。表达蛋白质组学包括二维凝胶电泳(2-DE),色谱与质谱结合分析法,肽和蛋白质的微阵列,组织阵列等等。磁珠结合MALDI-TOF-MS(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight MassSpectrometry)研究体液的蛋白质多肽差异图谱是近年来发展起来的一种蛋白质组学研究手段，该方法相比其它传统蛋白质组学研究方法，具有直接对临床标本高通量检测的潜质。

但是生物样品成分复杂，除了含有大量的蛋白质和多肽外，还含有盐、各种小分子、脂类等成分，导致其无法在MALDI等质谱上直接加样检测。如何实现快速、有效、高通量、多样本的同时提取蛋白质和多肽，制备样品的技术，是目前得到高敏感度可重性的临床蛋白质组学结果的关键。体液、细胞裂解液等生物样品的质谱蛋白质组学检测是一个重要领域。疾病相关的生物样品，比如血清，尿液等的临床蛋白质组学检测在疾病相关的标志物的筛选和鉴定方面有着重要的应用。为了解决将血清，血浆、尿液、唾液、细胞裂解液等生物样本高质量快速的处理用于临床蛋白质组学，目前研究者主要应用蛋白质芯片或磁珠这两种方法。蛋白质芯片主要用于SELDI-TOF MS质谱，MALDI-TOF MS系统以磁珠制备样品的技术为主。磁珠分离提取是一种近年来用的比较多的临床蛋白质组学样品预处理方法，通过将磁性的小珠子表面进行不同的修饰，使其可结合具有某类化学性质的蛋白分子。但是由于本身的结构限制，一般以8个样本一排同时操作为主，很难进行96孔样本高通量同时快速操作。而进口的临床蛋白质组学磁珠主要为德国Bruker公司生产，价格非常昂贵。另外萃取小柱是传统的质谱预处理方法，萃取小柱可用于蛋白质等大分子和药物盐类等小分子的分离。但传统的萃取小柱由于需要较大的样本体积，无法高通量快速的针对临床蛋白质组学的要求实现少量、大规模样本数、快速批量操作、直接用于质谱检测。为此我们发明一种直接用于临床蛋白质组学质谱检测的96孔高通量固相萃取小柱装置，能够低廉的实现大样本快速高、通量、规模化处理和制备临床样本,快速高效分离和富集蛋白质和多肽用于临床蛋白质组学研究。

发明内容

本发明针对现有质谱检测生物样品制备技术的局限，提供一种用于质谱分析的96孔高通量固相萃取装置，是一种具有高通量、操作简单、成本低廉、快速高效的生物样本(如血液、尿液、唾液、细胞或组织裂解液等)中的蛋白质或多肽的分离富集和提取，并直接高敏感度的用于蛋白质组学质谱检测中的96孔固相萃取装置。