[发明专利]一种检测浮游植物对铜配合物生物可利用性的方法

权利要求书

1.一种检测浮游植物对铜配合物生物可利用性的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）取近海典型浮游植物于f/2培养基中进行培养，该f/2培养基中含有用以标记近海典型浮游植物的CDs，获得CDs标记培养液，具体培养条件如下：f/2培养基中含有14~16 mg/L CDs，置于光照强度为130~150μmol photons （m² s）^-1，光暗比为12~15 h:8~10 h，温度为18~20℃ 生化培养箱中培养，以80~120 rpm搅拌海藻悬浮液模拟海水流动，同时减少CDs在容器壁上吸附；

（2）以二水合氯化铜溶液作为铜离子标准使用液，根据上述CDs在不同浓度的铜离子标准使用液中的荧光强度变化的情况，获得线性工作曲线： y=2294.9x+876.32，线性范围：20-1500ng/L，其中x表示铜离子浓度，y表示荧光强度变化；

（3）将CDs标记培养液分为两组，每组均分为相同的若干份，其中：其中一份作为对照，一份加入Cu²⁺，其余的分别加入不同的铜配合物；上述两组中的第一组置于暗处，第二组置于氙灯下连续光照2 h，每固定时间间隔取出，观察第二组相对第一组的不同的铜配合物的荧光强度变化；

（4）将步骤（3）所得不同的铜配合物的荧光强度变化代入步骤（2）的线性工作曲线，获得相应的铜离子浓度，即可得出浮游植物对不同铜配合物的利用情况；上述铜配合物包括Cu-Por、Cu-H₂Lp和EDTA-Cu。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述近海典型浮游植物包括威氏海链藻CCMA-102和小球藻CCMA-410。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述f/2培养基由浓度为75.0 g/L硝酸钠母液、浓度为5.0 g/L的磷酸钠母液、浓度为30.0 g/L的硅酸钠母液、微量元素母液、维生素母液和海水组成，且硝酸钠母液、磷酸钠母液、硅酸钠母液、微量元素母液、维生素母液和海水的体积比为2：2：2：2：1：2000，其中微量元素母液中含有氯化铁3.15 g/L、硫酸铜9.8 g/L、钼酸钠6.3 g/L、硫酸锌22.0 g/L、氯化钴10.0 g/L、氯化锰180.0 g/L，维生素母液含有维生素B12 1.0 g/L、生物素0.1 g/L和盐酸硫胺0.2g/L。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的固定时间间隔为30min。