[发明专利]一种防止RNA降解的样品保存液以及保存方法在审
申请号: | 201710124452.4 | 申请日: | 2017-03-03 |
公开(公告)号: | CN106857502A | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 王华林;张涛 | 申请(专利权)人: | 湖北新纵科病毒疾病工程技术有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司11212 | 代理人: | 杨立,陈璐 |
地址: | 430074 湖北省武汉市东湖开发区高新大道*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 防止 rna 降解 样品 保存 以及 方法 | ||
技术领域
本发明涉及分子生物学试剂领域,更特别地,涉及一种防止RNA降解的样品保存液,以及一种保存生物样品的方法。
背景技术
生物样品保存是病理学和科学研究中的不可或缺的一环,不同的检测目的需要不同的保存环境。RNA的检测已经逐渐成为针对病理样品和科研样品的重要检测指标之一。因此,生物样品的保存除了要注意保留生物样品的形态、蛋白质和基因组之外,防止RNA的降解也成为的必要条件之一。
由于生物体内以及环境中广泛存在RNA酶,这些酶很容易降解样品中的RNA,因此需要一种新的防止RNA降解的样品保存液。
发明内容
为解决以上问题,本发明提供了一种防止RNA降解的样品保存液,其包含0.1-0.5M的柠檬酸钠,质量体积比50-100%的硫酸铵,质量体积比30-50%的柠檬酸和质量体积比30-50%的硫酸钠,以上所述质量体积比为每100毫升溶剂中所含的溶质的克数。
本发明还提供了一种保存生物样品的方法,其包括将取得的新鲜的生物样品立即浸泡于权利要求1所述的样品保存液中并于低温下储存的步骤。
进一步地,所述生物样品为组织样品,所述组织样品与所述样品保存液的量的比为每1g样品5-10ml样品保存液。
优选地,所述组织样品中的每个组织块的大小不超过1×1×1cm。
进一步地,所述生物样品为培养的细胞或微生物,所述培养的细胞或微生物样品与所述样品保存液的量的比为每1ml样品5-10ml样品保存液。
优选地,储存时间短于一周时,储存温度不高于25℃。
优选地,储存时间为7-30天时,储存温度为不高于4℃。
优选地,储存时间长于30天时,储存温度为不高于-20℃。
使用本发明的样品保存液和方法可防止样品中的RNA在短期或长期保存过程中发生降解,保持样品中的RNA的完整性,为病理或科研的分析提供良好的分析材料。
附图说明
图1为本发明的样品保存液和市售的RNAlater于18-25℃储存7天后的小鼠心脏组织和皮肤组织提取的总RNA的琼脂糖凝胶电泳图,其中泳道1和3分别为本发明的样品保存液保存的心脏组织和皮肤组织,泳道2和4分别为市售的RNAlater保存的心脏组织和皮肤组织;
图2为本发明的样品保存液和市售的RNAlater于18-25℃储存7天后的小鼠肾组织提取的总RNA的琼脂糖凝胶电泳图,泳道1为本发明的样品保存液保存的肾组织,泳道2为市售的RNAlater保存的肾组织。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
1.样品保存液
所述样品保存液包含0.1-0.5M的柠檬酸钠,质量体积比50-100%的硫酸铵,质量体积比30-50%的柠檬酸和质量体积比30-50%的硫酸钠。
2.样品保存方法
该样品保存液适用于新鲜动植物组织和培养细胞、菌体,但不适用于保存冷冻样品。
保存步骤如下:
1)将新鲜组织样本切割为不超过黄豆大小的块;培养细胞、菌体可不进行处理;
2)将处理后的样本按照1g(1ml)样本加入5~10ml样本保存液的比例完全浸入样本保存液中;
3)将保存的样本储存于适当的环境下,保存时间与使用环境关系如表1所示。
表1储存时间与储存温度的关系
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