[发明专利]一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置和使用方法

权利要求书

1.一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于设有培养箱盖、培养箱、培养基质、同位素添加空间、菌丝室、排水箱盖、排水箱、过滤泵、植物生长室、喷嘴调控钩和尼龙网；所述培养箱盖盖在培养箱上，培养箱由纵向网分割成菌丝室和植物生长室，培养基质和同位素添加空间放置在菌丝室内，培养箱的底部设有排水孔；排水箱设在培养箱底部，排水箱盖盖在排水箱上，过滤泵设在排水箱内，喷嘴调控钩和尼龙网设在植物生长室内，喷嘴调控钩上设有雾化喷嘴，所述雾化喷嘴与过滤泵之间由软管连接，植物生长室的顶部设植物固定装置。

2.如权利要求1所述一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于所述培养基质采用陶粒或玻璃珠，所述陶粒的直径为5mm，玻璃珠的直径为2mm。

3.如权利要求1所述一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于所述植物固定装置采用固定管，所述固定管采用针管或PVC管。

4.如权利要求1所述一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于所述过滤泵上设定时器。

5.如权利要求1所述一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于所述过滤泵采用小型微过滤泵，所述小型微过滤泵采用HJ-1500型小型微过滤泵，25W，1500L/h，流量可调节。

6.如权利要求1所述一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于所述尼龙网采用不同孔径的尼龙网，所述尼龙网设上层尼龙网和下层尼龙网，上层尼龙网的孔径为1mm，下层尼龙网的孔径为30μm，上层尼龙网设在植物生长室高度12cm处，下层尼龙网设在植物生长室高度6cm处；所述排水孔上覆盖尼龙网。

7.如权利要求1所述一种定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置，其特征在于所述植物生长室的尺寸为20cm×20cm×20cm。

8.如权利要求1所述定时循环的AM真菌扩繁及功能实验装置的使用方法，其特征在于所述使用方法如下：

1)基本材料准备

A植物材料：所述植物材料选自宿主植物、白三叶、长夜车前草、红树秋茄中的一种；

B培养基质

按体积比，植物种子使用10％H₂O₂灭菌5min，然后用无菌蒸馏水冲洗干净，培养在28℃的恒温箱中预发芽；两格组合塑料箱、苗钵采用84消毒液和70％酒精灭菌；

2)培养系统的建立

5天后，预发芽的种子移栽至已灭菌的苗钵，苗钵中先添加600g沙土和沸石，按质量比，沙土︰沸石为3︰1，灭菌混合物，灭菌条件为121℃，30min，然后铺一层菌根接种剂，按质量比，接种剂量为生长基质总量的5％～10％，接着添加200g灭菌基质，每天浇灌无菌水，每3天浇一次1/4改良Hoagland营养液，植物在能够控制光照和温度的温室中进行培养；培养4周后，取出植物幼苗，用无菌水冲洗干净，随机选取植物根系采用曲利苯蓝染色-方格交叉法测定根系侵染率，之后移栽大小均一的幼苗到植物生长室顶部针管装置中，用无菌棉固定植物，分室底部排水箱添加4L 1/4改良Hoagland营养液，开启定时的过滤泵，调节雾化喷嘴为植物提供生长必需营养，整个系统形成定时循环设计；

所述改良Hoagland营养液的配方为：

磷酸二氢钾136g/L，硝酸钾101g/L，硝酸钙236g/L，硫酸镁246.5g/L，硼酸2.86g/L，氯化锰1.81g/L，硫酸锌0.22g/L，硫酸铜0.08g/L，锰酸0.02g/L，硫酸亚铁5.57g/L，乙二胺四乙酸7.45g/L；其中P元素含量要低于20μg/g；

3)培养过程

培养过程在温室中进行，育苗前期在培养基质表面覆盖一层黑色塑料薄膜，植物地上部保持在外部，植物幼苗移栽到分室装置后，根据植物需要调节浇灌时间和营养水平，培养过程中透过视窗随时观察较细菌根穿过上层尼龙网伸展到根系微生长空间或区隔室，或观察菌丝穿过下层尼龙网进入菌丝体生长室，开展根外菌丝功能研究。