[发明专利]基于聚腺嘌呤‑亚甲基蓝电化学传感器检测铜离子的方法

权利要求书

1.一种基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝电化学传感器检测铜离子的方法，其特征在于：

（1）金电极处理，电极直径d=2 mm：依次用0.3 μm和0.05 μm的Al₂O₃抛光粉打磨金电极，用MilliQ纯水、无水乙醇和MilliQ纯水依次超声清洗2 min后，在0.5 M H₂SO₄溶液中用循环伏安法，扫描范围为0.2 - 1.6 V，以扫速0.1 V /s、0.5 V /s分别扫描20圈，直至得到稳定的循环伏安曲线；

（2）用缓冲液配制1.2 μM的DNA（A₁₂）溶液；缓冲液含5 mM PBS、0.05 M NaCl、pH 7.4；

（3）将5.0 μL步骤（2）中的1.2 μM DNA（A₁₂）的溶液滴加在上述步骤（1）处理好的金电极上，在4℃下倒置反应2 h，自组装成功后，电极用二次蒸馏水冲洗干净，N₂吹干；

（4）将步骤（3）中的电极浸泡在100.0 μL的2.0 mM巯基己醇（MCH）溶液中封闭电极表面2 h，以除去电极表面上的DNA非特异性吸附；

（5）将上述步骤（4）制备的MCH/A₁₂/GE电极用二次蒸馏水浸泡4 min，N₂吹干后倒置，用于下一步检测；

（6）取20.0 μL MilliQ纯水为空白组或不同浓度的20.0 μL Cu²⁺ 溶液于电化学检测缓冲液中，总体积为2.0 mL，将步骤（5）的电极浸没于其中20 min；缓冲液含10 mM PBS、2M NaClO₄、pH 6.7；

（7）采用交流伏安法进行检测，扫描电位为0到 -0.7 V，记录空白电流值I₀和不同浓度Cu²⁺ 溶液的电流值I₁；

（8）以已知铜离子浓度为横坐标，其对应的△I（△I= I₀- I₁）为纵坐标，绘制曲线，得到铜离子浓度和△I的线性方程，然后根据待测样品△I，计算对应的铜离子浓度。

2. 根据权利要求1所述的基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝的电化学传感器检测铜离子的方法，其特征在于步骤（2）中所述的DNA（A₁₂）的序列为从左到右5’到3’： -HS-(CH ₂)₆-AAAAAAAAAAAA-(CH₂ )₆-MB-。

3. 根据权利要求1所述的基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝的电化学传感器检测铜离子的方法，其特征在于：步骤（3）中的DNA（A₁₂）浓度为1.2 μM，滴加量为5.0 μL。

4. 根据权利要求1所述的基于聚腺嘌呤-亚甲基蓝的电化学传感器检测铜离子的方法，其特征在于：所述铜离子浓度与△I的线性方程为△I/nA = 1.148+ 0.07358C _Cu²⁺ / μM。