[发明专利]用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液及其制备方法，每1L所述储存液中，原料组分包括：200～260mL丙三醇、300～400mL聚乙二醇、0.5～2mmol氯化钙和15～25mmol Tris‑HCl，余量为水；制备方法包括如下步骤：将氯化钙加入Tris‑HCl缓冲液中，待混合均匀后加入其他原料组分，搅拌均匀，得到储存液。本发明提供的保存大鼠肝匀浆S9的储存液，可以在保证大鼠肝匀浆S9活性基本不变的前提下，延长大鼠肝匀浆S9的保存时间，从而避免在使用的过程中反复的冻融而影响其活性；且本发明提供的保存大鼠肝匀浆S9的储存液的制备方法简单，生产成本低。

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液及其制备方法。

背景技术

大鼠肝匀浆S9是肝匀浆液的去线粒体上清液，包含了大量的CYPs等药物代谢酶，主要用于研究化合物的代谢和药物药物相互作用。目前国内外保存S9主要是保存于液氮或-80℃冰箱中，然而在具体使用的过程中，反复的冻融会造成酶的活性大大降低，从而不利于大鼠肝匀浆S9的充分利用。因此，需要研究开发新型的用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液，以便能够在相对较高的温度长时间保存大鼠肝匀浆S9，而且能够保证原有的活性。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明目的在于提供一种用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液及其制备方法，以在保证大鼠肝匀浆S9活性基本不变的前提下，延长大鼠肝匀浆S9的保存时间，从而避免在使用的过程中反复的冻融而影响其活性；制备方法简单，生产成本低。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案为：

第一方面，本发明提供了一种用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液，其原料组分按重量份计，包括：200～260mL丙三醇、300～400mL聚乙二醇、0.5～2mmol氯化钙和15～25mmolTris-HCl，余量为水。

在本发明的进一步实施方式中，原料组分还包括：35～50g二十碳五烯酸和14～18g乳糖酸。

在本发明的进一步实施方式中，Tris-HCl的pH值为7.4；水为去离子水。

在本发明的进一步实施方式中，聚乙二醇的相对分子质量为7500～8500。

第二方面，本发明提供了上述用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液的制备方法，包括如下步骤：将氯化钙加入Tris-HCl中，待混合均匀后加入其他原料组分，搅拌均匀，得到储存液。

第三方面，本发明提供了用于保存大鼠肝匀浆S9的储存液在保存大鼠肝匀浆S9中的应用，包括如下步骤：将大鼠肝匀浆S9和储存液以(1.0～1.2):1的体积比混合均匀，然后于-20℃～4℃的条件下保存。

第四方面，本发明提供了制备上述大鼠肝匀浆S9的诱导剂，诱导剂的原料组分按重量份计包括：苯巴比妥4～7重量份、β-萘黄酮2～4重量份和磺吡酮15～20重量份。

在本发明的进一步实施方式中，诱导剂的原料组分还包括川穹提取物6～8重量份；川穹提取物的制备方法包括如下步骤：将粉碎至60～100目的川穹和质量分数为60％～70％的乙醇水溶液以1:(8～10)的质量比混合均匀，然后在70～80℃下浸泡10～12h，浸泡的pH值为4.6～5.2；将浸泡得到的产物在35～40℃下超声提取5～8h，将超声提取得到的产物过滤，收集滤液并进行脱色处理；将脱色处理后的产物浓缩成相对密度为1.05～1.25的浸膏，得到川穹提取物。