[发明专利]一种适用于黄檀组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明属于植物繁殖技术领域，涉及一种适用于黄檀组培快繁方法。

背景技术

黄檀（Dalbergia hupeana Hance），豆科，别名：不知春、望水檀、檀树等，乔木，高10-20米，树皮暗灰色，呈薄片状剥落，产山东、江苏、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州、云南，海拔600-1400米，平原及山区均可生长，喜光，耐干旱瘠薄，不择土壤，但以在深厚湿润排水良好的土壤生长较好，忌盐碱地；深根性，萌芽力强，生于山地林中或灌丛中，山沟溪旁及有小树林的坡地常见，其根皮，夏、秋季采挖，味辛、苦，行平，小毒，具有清热解毒、止血消肿之功效，主治疮疥疗毒、毒蛇咬伤、细菌性痢疾、跌打损伤等，民间用于治疗急慢性肝炎、肝硬化腹水。组织培养能通过无性繁殖，遗传树种的优良特性，能在短时间内快速繁殖获得大量优质的组培苗，为优质种源推广提供可能。

发明内容

本发明的目的是针对黄檀组织培养过程中芽增殖系数低，生长缓慢等问题,提供一种生长效果好、扩繁快的黄檀嫩枝组培繁殖方法。

为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：

一种适用于黄檀组培快繁方法，包括外植体选择、外植体处理、初始芽诱导培养、增殖培养、壮芽培养和生根培养工序，采集半木质化、生长健壮的当年生黄檀嫩枝作为外植体，对外植体进行修剪、灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于增殖培养基中经过3-4个周期增殖培养，形成丛生芽，将丛生芽接入壮芽培养基中培养，最后将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根，具体操作步骤如下：

（1）外植体选择：采集半木质化、生长健壮的当年生黄檀嫩枝作为外植体；

（2）外植体处理：将外植体置于自来水下冲洗10-15 min，然后去除外植体叶片，再将外植体浸泡在体积浓度 0.1%的升汞溶液中，控制浸泡时间15-20 min，最后用纯净水洗净药物，将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5-3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；

（3）初始芽诱导培养：将步骤（2）得到的外植体接种于初始芽诱导培养基中培养，培养30-35 d，初始芽萌发、生长；

（4）增殖培养：将高≥1cm的初始芽接入增殖培养基中进行增殖培养，35-40 d转接一次，循环往复，经3-4个周期的培养，形成丛生芽；

（5）壮芽培养：将步骤（4）得到的丛生芽进行切割，4-5颗芽/丛，插入壮芽培养基中，培养35-40 d，形成壮芽；

（6）生根培养：将步骤（5）得到的高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根；余下小芽丛再次接种于步骤（4）的增殖培养基中继续增殖，然后再重复步骤（5），循环往复，获得大量壮芽。

以上所述的初始芽诱导培养基的配方为：1/2改良MS培养基+6-BA 4.0-6.0 mg/L+NAA 2.0-3.0 mg/L+KT 1.0-2.0 mg/L+ZT 1.5-2.0 mg/L+ VC 15 mg/L+叶酸10mg/L+VB₂ 15 mg/+琼脂3.0 g/L+卡拉胶25 g/L。

以上所述的增殖培养基的配方为：改良1/2MS培养基+6-BA 6.0-8.0 mg/L+NAA 2.0-3.0 mg/L+ZT 0.5-1.0 mg/L+VC 15 mg/L+VB₂ 15 mg+L-半胱氨酸 20 mg/L+琼脂 3.6 g/L+卡拉胶 30 g/L。

以上所述的壮芽培养基的配方为：改良MS培养基+6-BA 3.0-4.0 mg/L+NAA 1.0-1.5 mg/L+VC 15 mg/L+VB₂ 15 mg+L-半胱氨酸 20 mg/L+琼脂 3.5 g/L+卡拉胶 25 g/L。

以上所述的生根培养基的配方为：1/2改良MS培养基+6-BA 1.5-2.5 mg/L+NAA 1.0-1.5 mg/L+琼脂 3.5 g/L+卡拉胶 30 g/L。