[发明专利]一种盐芥的无菌嫁接方法

说明书

本发明公开了一种盐芥的无菌嫁接方法，它解决了现有技术中盐芥嫁接方法的技术空白。其技术方案为：将萌发后7‑10天的盐芥无菌苗作为砧木和接穗。在无菌条件下进行嫁接，将嫁接体置于含有琼脂粉、蔗糖和铁离子的1/2MS培养基上，18‑22℃下短日照光照下竖直培养，再将嫁接苗移至1/2hogland营养液中水培或营养土培养。本发明的嫁接方法简单易行、操作方便、减少污染、成活率高、伤害小、成本低，为小型植株嫁接提供了新思路、新方法及新途径，同时为植物嫁接在农艺性状、分子机理等现在分子及生理方面的相关理论研究提供了基础。

技术领域

本发明涉及植物嫁接技术领域，特别是涉及一种体型较小的耐盐模式植物盐芥的无菌嫁接方法。

背景技术

植物之间的嫁接是一种古老的农艺技术，时至今日，在园艺生产上，嫁接仍旧是园艺领域常用的技艺。其作为一种农业生产技术，已广泛用于农业、林业和园艺植物的栽培及科研开发。尽管嫁接技术历史悠久，但真正大量的研究始于上世纪七八十年代，特别是近十年来，随着生物技术的迅速发展，嫁接的研究逐渐从过去传统的农艺性状的研究过渡到分子机理的研究。

影响嫁接成活的因子有多种，如砧木与接穗的亲和力，砧木与接穗的质量，以及温度、湿度及光照等方面的差异等。而且，不同物种的不同时期的嫁接成活率也不同，即使是同一物种在不同时期，其嫁接体的成活率也相差很大。

盐芥属于十字花科盐芥属的一种耐盐植物，在营养土中其生长特点为：萌发后的前三周生长缓慢，然后进入迅速生长期。以盐芥作为耐盐模式植物来研究植物耐盐机理，越来越受到科学家们的重视，但盐芥作为一种小型草本植物，常规的嫁接技术难以实现，因此有关盐芥嫁接方法的研究至今未见报道。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种盐芥的无菌嫁接方法。该方法简单易行、操作方便、污染小、成活率高、伤害小、成本低，解决了由于盐芥植株小带来的嫁接操作难度大，切口不平整，嫁接成活率低等问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种盐芥的无菌嫁接方法，步骤如下：

(1)砧木和接穗准备：将盐芥种子经消毒处理后，种植于固体培养基上，层积5-7天后转入短日照或长日照条件下竖直培养，萌发后7-10天作为砧木苗或接穗苗，用于嫁接；

(2)无菌条件下进行盐芥的嫁接；

(3)嫁接体培养：将嫁接好的盐芥/盐芥复合体转入短日照培养10-15天；

(4)嫁接苗的移栽：将嫁接成功的嫁接苗移栽至水培营养液或营养土中继续培养。

优选的，步骤(1)中，盐芥种子消毒处理的方法为：用质量浓度为0.5％的NaClO消毒6-8分钟，然后用无菌水清洗4-6次。

优选的，步骤(1)中，所述固体培养基为含有琼脂粉、蔗糖和铁离子的1/2MS培养基；进一步优选的，培养基中琼脂的质量百分含量为1-1.5％；更优选为1.2％。培养基中蔗糖的质量百分含量为1％；Fe²⁺浓度为0.15mmol/L。

优选的，步骤(1)中，长日照培养的条件为：16h光照/8h黑暗，光照条件下的温度为21-23℃，黑暗条件下的温度为18-20℃，光强为8000lux，相对湿度大于70％。

优选的，步骤(2)中，所述嫁接的方法为：将长势一致的盐芥下胚轴1/2偏上端处切下，然后将作为砧木的部分移至另一含有琼脂粉的1/2MS培养基中，并套上长3-6mm，内径/外径为0.3mm/1.5mm的无菌塑料管，在解剖镜下将接穗的下胚轴与砧木在套管内对接形成嫁接体，最后将培养皿迅速封口。