[发明专利]一种检测样本中乳糖含量的试纸及该试纸的制备方法

说明书

一种检测样品中乳糖的试纸及该试纸的制备方法，选取滤纸，做底物载体，用烘干技术，将乳糖酶加入到滤纸上烘干，将TMB、辣根过氧化物酶、半乳糖氧化酶依次加入到另一滤纸上，分步烘干；选取pvc板，用于固定烘干后的滤纸，最后裁剪成乳糖检测试纸；本制备试纸可检测样本中是否存在乳糖，由于使用了酶促反应，反应迅速，灵敏度高，采用试纸方法，可一次加样完成检测，通过颜色变化来判断结果，简单易用，本发明制备工艺简单，成本较底，易于推广，可用于快速检测样本中是否含有乳糖。

技术领域：

本发明涉及一种检测试纸，属于检测样本中是否含有乳糖的技术领域，比如粪便样本，尤其适合快速检测粪便样本中是否含有乳糖的试纸及该试纸的制备方法。

背景技术：

乳糖主要来源于哺乳动物的乳汁中，而且每种哺乳动物的乳汁乳糖含量是不同的，比如，人乳含乳糖7％,牛奶中含乳糖4.2％,山羊奶含乳糖4.6％。牛奶是一种极富营养的饮品,对于婴幼儿来说是母乳最佳替代品。牛奶中含有蛋白质、碳水化合物、磷脂及钙、锌等多种微量元素。饮奶可以补充蛋白质等营养及钙、锌等微量元素；降低佝偻病、骨质疏松症、贫血、心血管疾病等疾病发生的几率。

正常人饮入含有乳糖的奶制品后，乳糖在小肠中会被位于小肠黏膜面绒毛远端刷状缘上的乳糖酶分解为一分子葡萄糖和一分子半乳糖，葡萄糖和半乳糖均为单糖，可以直接被细胞吸收，葡萄糖进入糖酵解途径继续分解；半乳糖则由半乳糖激酶转化为半乳糖-1-磷酸，之后在半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶作用下，形成UDP-半乳糖，UDP-半乳糖在NAD+为辅酶的情况下，被UDP-半乳糖4-差向异构酶转换为UDP-葡萄糖，UPD-葡萄糖在UDP-葡萄糖焦磷酸化酶催化下转变为葡萄糖-1-磷酸，进而进入糖酵解途径继续分解。

乳糖不耐受症是指小肠尤其是空肠黏膜表面绒毛顶端的乳糖酶分泌量减少或活性不高不能完全消化和分解乳汁中乳糖，部分乳糖被结肠菌群酵解成乳酸、氢气、甲烷和二氧化碳。乳酸刺激肠壁，增加肠蠕动而出现腹泻。二氧化碳在肠道内产生胀气和增加肠蠕动，使儿童表现不安，偶尔还可能诱发肠痉挛出现肠绞痛。乳酸的增加还使粪便的pH值降低。

据统计，全世界都存在乳糖不耐受的问题，发生率与种族有关，亚洲人95-100％、黑人60-80％、中欧人2-23％、美洲白人6-22％。据中国疾病预防控制中心调查，我国北京、上海、广州等地3-13岁儿童乳糖不耐受症和乳糖吸收不良发生率约为80％。医学上目前认为，确定诊断乳糖不耐受症状可靠的方法是空肠活检直接测定乳糖酶的活性，但其侵入性使其难作为常规手段。氢呼气实验(HBT)是一种准确的非创伤性诊断方法，但需要特殊的仪器、设备、时间，基层单位不宜推广，也不利于样本量大的人群调查。斐林试剂法测还原糖也是一种准确的体外无创伤性诊断，但其反应过程需要加热，因此诊断过程需要较多的时间和相应的设备。醋酸铅法为目前临床常用，但醋酸铅存在一定的危险性，并且操作过程需要加热，反应过程相对复杂。本项目采用干化学法测定粪便中的乳糖，整个反应在常温下进行，可以不需要任何设备，就能快速的定性诊断。

目前干化学法检测乳糖不耐受症已公开的技术专利200610056826.5，其通过检测尿液中的半乳糖来判断乳糖不耐受症的依据，上述专利的局限性在于：1)其检测人尿液中的半乳糖，需要增加尿液纯化装置，增加了检测的步骤及成本；2)将半乳糖氧化酶垫、过氧化物酶垫、显色剂垫分别制作后叠加在一起，加样后通过各试纸的正向层析作用反应，显示的方式不够直观。3)上述技术无法对粪便等其它样品中是否含有乳糖进行检测，有着检测样品的局限性。

发明内容：

针对现有技术中存在的缺陷，本发明提供一种制备简单，使用方便，直接检测乳糖的试纸及该试纸的制备方法。

为实现上述目的，本发明技术方案为：

一种检测样本中乳糖含量的试纸，包括：底板，乳糖酶吸附试纸，显色试纸，吸水纸；其中，乳糖酶吸附试纸，显色试纸，吸水纸以尾端叠加的方式贴附在底板上固定。

进一步，乳糖酶吸附试纸与显色试纸叠加位置处通过胶带固定。