[发明专利]一种有关KRAS基因突变的T细胞受体

说明书

本发明公开了一种T细胞受体，其与KRAS基因12密码子突变G12D 26aa肽段特异性结合，所述肽段的氨基酸序列为：MTEYKLVVVGADGVGKSALTIQLIQN，如SEQ ID NO：1所示；该T细胞受体具有识别HLA分子抗原复合物时，具有更高的亲和力的9‑12aa抗原表位多肽如下：VVVGADGVGK，如SEQ ID NO：48所示；KLVVVGADGVGK，如SEQ ID NO：49所示；所述HLA分子为HLA‑A0301；公开了在识别KRAS基因G12D突变肽段与HLA‑A0301形成的抗原复合物时，其T细胞受体的α链和β链的氨基酸序列。此外，本发明还公开了编码上述T细胞受体的α链和β链的核苷酸序列、包含上述核苷酸序列的载体、包含上述核苷酸序列的细胞以及上述载体或上述细胞在制备防治KRAS基因突变相关疾病的药物中的应用。

技术领域

本发明涉及一种T细胞受体(TCR)，尤其涉及一种有关KRAS基因突变的T细胞受体。本发明还涉及TCR基因转移以产生T细胞的用途，以及它们用于防治与KRAS基因12密码子突变相关疾病的制药用途。

背景技术

KRAS是一种原癌基因，长约35kb，位于12号染色体，是RAS基因家族成员之一，编码KRAS蛋白。与肿瘤的生成，增值，迁移，扩散以及血管生成均有关系。

KRAS基因(KRAS,p21)家族与人类肿瘤相关的基因有三种——H-ras、KRAS和N-ras，分别定位在11、12和1号染色体上。KRAS基因编码21kD的ras蛋白又名p21基因。在ras基因中，KRAS对人类癌症影响最大，它好像分子开关：当正常时能控制调控细胞生长的路径；发生异常时，则导致细胞持续生长，并阻止细胞自我毁灭。她参与细胞内的信号传递，当KRAS基因突变时，该基因永久活化，不能产生正常的ras蛋白，使细胞内信号传导紊乱，细胞增殖失控而癌变。

研究表明约30％的人类恶性肿瘤与RAS基因突变有关，ras突变后的产物可以一直处于活化状态。在白血病，肺癌，直肠癌和胰腺癌中，KRAS突变均很常见，其中直肠癌中30％-35％患者有突变。

其与肿瘤细胞的生存，增值，迁移，扩散，血管生成均有关系。KRAS基因分为突变型和野生型，常见突变位点为KRAS基因2号外显子的12号密码子和13号密码子上，3号外显子的61号密码子，其中有7个突变热点：G12C、G12R、G12S、G12V、G12D、G12A、G13V/D.这7种突变占到了90％以上。

KRAS基因(GenBank:NC_000012)突变在胰腺癌的发生发展中起重要作用。已报道，在胰腺癌组织、胰液或粪便、血液中可检测出KRAS基因第12、13或61密码子点突变(Takahashi,et al.Gastrointestinal Endo 2005.61:76－9；Luigi L,et al.Oncogene2002.21:4301－6；Tada M,et al.Cancer Res1993.53:2472－4；Lu XH,et al.Natl Med JChina 2001.81:1050–3；N van Heek,et al.J.Clin.Pathol.2005.58:1315-1320)。

目前，尚未见有关KRAS基因突变的T细胞受体，存在对治疗和/或预防与KRAS基因12密码子突变相关疾病的方法的需求。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一种有关KRAS基因突变的T细胞受体。

本发明要解决的技术问题之二是提供编码上述T细胞受体的α链和β链的核苷酸序列。

本发明要解决的技术问题之三是提供包含上述核苷酸序列的载体。

本发明要解决的技术问题之四是提供包含上述核苷酸序列的细胞。

本发明要解决的技术问题之五是提供上述载体或上述细胞在制备防治KRAS基因突变相关疾病的药物中的应用。