[发明专利]一种同时预防人3型腺病毒-人55型腺病毒-人7型腺病毒的多表位疫苗候选株

说明书

本发明涉及重组病毒基因工程技术领域，具体涉及一种同时预防人3型腺病毒‑人55型腺病毒‑人7型腺病毒的多表位疫苗候选株，在人3型腺病毒六邻体的HVR2区、HVR5区分别插入人55型腺病毒中和抗原表位55R2、人7型腺病毒中和抗原表位7R5，该疫苗候选株可以诱导同时抗人3型、7型、55型腺病毒的免疫反应，利用该疫苗候选株可以制备预防人3型、7型、55型腺病毒的三价疫苗。

技术领域

本发明涉及重组病毒基因工程技术领域，具体涉及一种同时预防人3型腺病毒-人55型腺病毒-人7型腺病毒的多表位疫苗候选株。

背景技术

人腺病毒(human Adenovirus, HAdV)感染的患者主要是婴幼儿及体弱人群，特别是其感染导致的重症肺炎病死率高。腺病毒流行范围广，传播速度快，近年来在多个国家和地区爆发和流行，给人们的公共卫生安全带来了极大的威胁。导致重症肺炎的腺病毒主要是B组的呼吸道腺病毒，近几年在全世界范围内均有呼吸道腺病毒爆发流行的报道。B组呼吸道腺病毒中的3，7，14，55型经常在人群中流行，造成重症肺炎。相对其它型别的腺病毒感染（人3、7、14 型等）HAdV-B55感染引起的肺炎症状通常更严重。

接种腺病毒疫苗是预防腺病毒感染最有效的方法之一，但安全有效的腺病毒疫苗一直以来未被研究开发。上世纪70、80年代美国研制并曾经在军队新兵中使用的人4型、7型肠溶型腺病毒活疫苗被证明对腺病毒引起疾病非常有效，目前世界范围内只有在美国军队中使用，但单价的腺病毒活苗存在一定的安全隐患。目前我国还没有呼吸道腺病毒疫苗投入使用。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种重组人3型腺病毒及其制备方法和应用。

本发明提供了一种重组人3型腺病毒，所述重组人3型腺病毒是在人3型腺病毒六邻体（Ad3）的HVR2区、HVR5区分别插入人55型腺病毒（Ad55）中和抗原表位55R2、人7型腺病毒（Ad7）中和抗原表位7R5；其中，所述人55型腺病毒中和抗原表位55R2的氨基酸序列为LKVSDEESK，所述人7型腺病毒中和抗原表位7R5的氨基酸序列为EAADAFSPE。

优选的，所述人55型腺病毒中和抗原表位替换的氨基酸序列为人3型腺病毒六邻体HVR2区的TTEGEE。

优选的，所述人7型腺病毒中和抗原表位替换的替换氨基酸序列为人3型腺病毒六邻体HVR5区的DAVAGALA。

本发明还提供了一种同时预防人3型腺病毒-人55型腺病毒-人7型腺病毒的多表位疫苗候选株，所述多表位疫苗候选株含有上述所述的重组人3型腺病毒。

本发明还提供了一种载体，所述载体包含上述所述的重组人3型腺病毒。

本发明还提供了一种重组人3型腺病毒的制备方法，包括如下步骤：

在人3型腺病毒六邻体的HVR2区、HVR5同时插入人55型腺病毒中和抗原表位55R2、人7型腺病毒中和抗原表位7R5；其中，

所述人55型腺病毒中和抗原表位55R2的氨基酸序列为LKVSDEESK；

所述人7型腺病毒中和抗原表位7R5的氨基酸序列为LKVSDEESK和EAADAFSPE。

本发明所提供的重组人3型腺病毒，允许Ad55、Ad7中和表位个别氨基酸的缺失、替换或添加。但需要保持中和表位的免疫原性；允许被置换的HVR2、HVR5区个别氨基酸的缺失、替换或添加，但需要保持腺病毒的稳定性，同时保证外源表位的免疫活性。

本发明的有益效果在于：本发明中，在人3型腺病毒六邻体衣壳上同时展示Ad55、Ad7的中和表位，该重组腺病毒可以产生抗Ad3、Ad55、Ad7感染的免疫应答，多次免疫注射能加强免疫。该重组病毒可以同时预防Ad3、Ad55、Ad7感染。

具体实施方式