[发明专利]一种人羊膜间充质干细胞的专用培养基在审
申请号: | 201710048550.4 | 申请日: | 2017-01-20 |
公开(公告)号: | CN106701673A | 公开(公告)日: | 2017-05-24 |
发明(设计)人: | 谷涌泉;刘英 | 申请(专利权)人: | 北京天晟宇生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 天津欣达睿诚知识产权代理事务所(普通合伙)12216 | 代理人: | 李欣 |
地址: | 100084 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 羊膜 间充质 干细胞 专用 培养基 | ||
1.人羊膜间充质干细胞专用培养基,其特征在于:由α-MEM培养基、人血浆和人血白蛋白组成。
2.根据权利要求l所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基,其特征在于:所述人血浆的体积百分比浓度是10%,人血白蛋白的浓度为1%。
3.根据权利要求1或2所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基,其特征在于:所述人血浆为人AB型血浆。
4.根据权利要求3所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基,其特征在于:所述人羊膜间充质干细胞专用培养基的pH值为7.2-7.4。
5.根据权利要求4所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基,其特征在于:所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基用于培养人羊膜单个核细胞。
6.根据权利要求4所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基,其特征在于:所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基用于培养人羊膜间充质干细胞。
7.一种培养人羊膜间充质干细胞的方法,其特征在于:将离体的人羊膜单个核细胞按1×106个细胞/cm2接种于培养瓶中,培养于37℃,5%CO2培养箱,培养液为权利要求1至4中任何一项所述的人羊膜间充质干细胞专用培养基;24小时后换液,弃非贴壁细胞,以后每2~3天换液;待人羊膜间充质干细胞生长到70~80%融合,用0.25%胰酶消化,按0.8×104~1.0×104个细胞/cm2传代;每2~3天用该人羊膜间充质干细胞专用培养基中传代一次,使细胞浓度维持在5×105~10×105个细胞/mL;每次传代培养的条件均为37℃,5%CO2。
8.根据权利要求7所述的培养人羊膜间充质干细胞的方法,其特征在于:所述传代培养为传5代得到人羊膜间充质干细胞。
9.用权利要求7或8的培养人羊膜间充质干细胞的方法得到的人羊膜间充质干细胞。
10.根据权利要求9所述的人羊膜间充质干细胞,其特征在于:所述的人羊膜间充质干细胞,表达如下三种间充质干细胞细胞膜分子:人白细胞分化抗原CD73、人白细胞分化抗原CD90和人白细胞分化抗原CD105;不表达如下二种细胞膜分子:人白细胞分化抗原CD45和人白细胞抗原HLA-DR。
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